外周血单个核细胞分离

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人外周血单个核细胞分离自外周血。外周血单个核细胞( PBMC )即外周血中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞和单核细胞。

外周血中单个核细胞（淋巴细胞和单核细胞）的比重介于1.075～1.090之间，红细胞及粒细胞在1.092左右，血小板在1.030～1.035之间，因而可利用一种比重介于1.075～1.092之间而近于等渗的溶液作密度梯度离心，使一定比重的细胞按相应密度梯度分布而加以分离。

对分离介质的基本要求是：

①对细胞无毒；

②基本等渗；

③不溶于血浆及分离物质；

④有特定的比重。

Ficoll分离液（2份6%聚蔗糖蒸馏水溶液与1份34%生理盐水溶液混合）为常规的淋巴细胞分离液，其比重为1.077 ±0.002，主要用于分离外周血中单个核细胞。

分离步骤

1、取新鲜抗凝全血，15ml离心管

2、在离心管中加入适量分离液，1:1稀释成10ml溶液。

3、将试管放入可成低速离心机中，水平转子800xg，离心20min

离心后将出现明显的分层:最上层是稀释的血浆层，中间是透明的分离液层，血浆与分离液之间的白膜层即为单个核细胞层，离心管底部是红细胞与粒细胞。

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