切好的冷冻切片立即投入丙酮中进行固定，通常固定1～2 min即可进行染色，用于免疫组化染色的冷冻切片应在切片略干时立刻投入冷甲醇中固定10~15 rmin然后进行相应的安排化学染色程序。
1．冷冻切片的HE染色程序。
切片在丙酮中固定1～2 min。
水洗5 s。
在0.5％的盐酸乙醇液中分解1～3 s。
水洗5 s。
甲苯I、二甲苯Ⅱ通明各5 s。
运用新鲜的Harris苏木精染液染细胞核2min。
水洗5 s。
干安排周围的二甲苯，在二甲苯尚未枯燥前滴加光学树脂胶封片。
在0.5％～1％的伊红染液中染细胞质20~30 s。
水洗5 s。
在95％乙醇I、95％乙醇Ⅱ、100％乙醇I、ELISA试剂盒100％乙醇Ⅱ、中逐级脱水各3～5 s。
ELISA试剂盒实验冷冻切片的制作办法
运用氯乙烷喷洒、二氧化碳喷发、半导体制冷的办法均可制作通常的冷冻切片，用于术中的病理确诊。恒冷箱冷冻切片机可以制作适用于各种目地的冷冻切片，是现在zui为常用的抱负冷冻切片制片方法。
标本冷冻完成后将标本托固定在切片机的机头上，调整机头方位使其刚好坐落切片刀的后方。
将恒冷箱冷冻切片机的速冻头和箱内温度调整到适合的切温度，通常状况下为一18～一25℃。
运用粗切削方法进行标本的粗切削至露出标本的zui大平面，ELISA试剂盒运用主动推动方法接连切削2～3刀后用毛笔清除机头、标本托及切片刀上的安排碎屑。
以主动推动的方法进行切片，杰出的切片将在防卷板的下方形成一张完好平坦的薄片，如切片略有曲折可用小毛笔悄悄展平切片。
在标本冷冻托上涂布一层*一OCT，然后将选材后新鲜标本安放在标本冷冻托上并用OCT掩盖标本。
打开防卷板，用载玻片平稳地轻压切片使其平坦地吸附到载玻片上。
调整并承认切片的厚度，通常为4～8 um，染脂肪和神经安排应控制在12~25 um。
ELISA试剂盒实验放下防卷板使防卷板的方位刚好与切片刀的刀刃*平行并略突出于刀刃。