造成ELISA试剂盒实验结果不乐观的因素
时间:2018-03-21 阅读:120
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样品相关事宜解说:
1、样品的采集:
(1)血浆:将全血收集到含抗凝剂的离心试管中,采集后立即离心。
(2)血清:静脉穿刺采集全血,待其凝血,室温下离心获取血清。
2、样品的稀释:在实验时,如果血清样品中的浓度高于zui高标准品中的浓度,则应将此样品用零标准品稀释10或100倍,并按实验步骤重新检测,在计算浓度时应当将此稀释因子考虑进去。
3、样品的储存:实验开始前,应当将样品用盖子盖好,2-8℃环境下可稳定存放5天,如果实验前想要将样品存放更长的时间,则应将样品冻存于-20℃的环境下,解冻的样品在实验前应反复倒置几次。
造成ELISA试剂盒实验结果不乐观的因素:
A、试剂盒没有按规定进行保存,受高温影响。
B、试剂盒、样品用前未平衡至室温。
C、加入试剂的体积和时间有误,移液器计量不准,吸嘴内水分太多或不清洁。
D、必须在有效期内使用,超过有效期的产品可能会产生很弱的信号。
E、孵育时间及孵育温度未达到要求,反应板放入培养箱时注意温度并及时调整。
F、洗板及加样过程中,酶标受污染失活而失去催化显色剂显色的能力。
G、蒸馏水水质有问题。
H、洗板次数过多,或浓缩洗液稀释倍数不符合要求,洗涤冲击力太大,浸泡时间太长。
I、显色剂加量不足或顺序颠倒,或混合后加入。
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