抗原在ELISA试剂盒中的使用
时间:2018-03-02 阅读:139
抗原,ELISA试剂盒是指能在体内引起免疫反响的物质;某一物质能否成为抗原,首先是由它本身的某些性质决议的。抗原的纯度不高,特异性不强;组成抗原一般为多肽片段,缺少天然抗原所具有的立体结构表位,亲和力不高,可能导致相应表位的抗体漏检:基因重组抗原具有安全、特异性强、亲和力高、产量大等特色,是一种比较抱负的抗原,但其纯化比较波折。荧光和化学发光测定的敏感度均高于比色测定,规范曲线的线性范围亦较比色反响宽,测定作用优于常用的比色ELISA试剂盒,抗体在ELISA试剂盒中运用的抗体可分为多克隆抗体(多抗)和单克隆抗体(单抗)。在运用双单抗一步法时,应留意抗原过剩时的“钩状效应”。而单抗仅针对抗体的单一表位,亲和力和特异性均较多抗高,且制备技术老练,产量大,批间差异小,但结合位点的单一也正是其缺点之地点,在双抗体夹心法中,如包被和指示抗体运用同一单抗,则因为结合位点的缺少,寻常造成假阴性成果。多为体外的蛋白、病菌等各类物质,椰油机体本身的,如本身免疫缺点病症会对本身发生免疫。多抗取白免疫动物的抗血清,制备较简略,但抗血清成分复杂,除含针对抗原(多个表位)的抗体外,还含有多种其他抗体,亲和力和特异性相对要低于单抗,且制备周期长,批间差异较大。主要有3类,即自然抗原、人工组成抗原和基因重组抗原。抗原在ELISA试剂盒中运用的抗原要求有较高的特异性、亲和力和纯度。
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