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ELISA试剂盒实验操作技巧有好方法

时间:2018-01-08      阅读:235

ELISA试剂盒选用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。该法适于测定细胞培养上清、血清、血浆及组织液中的样本,搅扰小能够测到每毫升纳克水平的细胞因子(或受体)的水平。在这种测定办法中有3种必要的试剂:
①固相的抗原或抗体。
②酶标记的抗原或抗体。
③酶效果的底物。
依据ELISA试剂盒试剂的来历和标本的性状以及检测的具备条件,可规划出各种不同类型的检测办法。  
(一)双抗体夹心法。
(二)双位点一步法。
(三)间接法测抗体。
(四)竞争法。
(五)捕获法测IgM抗体。
(六)运用亲和素和*。
遍及用作非放射性同位素的成键化验. 在这种办法中, 一般规范配体是固定的, 经过参加溶液相受体或蛋白质来使之成键. 经过参加与受体特异性反响的抗体来定量成键的受体, 而且开始抗体的量以参加第二种能显色的抗体丈量. 第二种抗体能识别抗体的末端, 在其末端的碱性磷酸酯或过氧化物酶等与酶发作反响, 从而使溶液显色.
ELISA试剂盒操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃,运用前室温平衡20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶*溶解后再运用。
2. 试验中不必的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 严厉依照阐明书中标明的时刻、加液量及次序进行温育操作。

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