ELISA试剂盒的技能关键包含三个方面：试剂的制备、反响条件的挑选和操作的标准化。一、试剂的制备ELISA的主要试剂为固相的抗原或抗体、酶符号的抗原或抗体和与符号酶直接相关的酶反响底物。以下叙说这些试剂的质料和制备办法。

（一）固相载体可作 ELISA试剂盒中载体的物质许多，zui常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的功能，抗体或蛋白质抗原吸附其上后保存本来的免疫活性。聚苯乙烯为塑料，可制成各种形式。

（二）免疫吸附剂固相的抗原或抗体称为免疫吸附剂。将抗原或抗体固相化的过程称为包被（coating）。由于载体的不同，包被的办法也不同。如以聚苯乙烯ELISA板为载体，通常将抗原或抗体溶于缓冲液（zui常用的为pH9.6的碳酸缓冲液）中，加于ELISA板孔中在4℃，经清洗后即可运用。如果包被液中的蛋白质浓度过低，ELISA试剂盒固相载体表面有能被此蛋白质*掩盖，其后参加的血清标本和酶结合物中的蛋白质也会部分地吸附于固相载体表面，zui终发生非特异性显色而导致本底偏高。     

（三）抗原和抗体在 ELISA试剂盒施行过程中，抗原和抗体的质量是试验是否成功的关键因素。本法要求所用抗原纯度高，抗体效价高、亲和力强。 ELISA试剂盒 所用抗原有三个来源：天然抗原、重组抗原和组成多肽抗原。天然抗原取材于动物安排或体液、微生物培育物等，一般含有多种抗原成分，需经纯化，提取出特定的抗原成分后才可运用，因而也称提纯抗原（purifiedantigen）。重组抗原（recombinantantigen）和多肽抗原（peptideantigen）均为人工组成品，运用安全，并且纯度高，搅扰物质少。