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ELISA试剂盒标准曲线样品检测时需要注意

时间:2017-08-21      阅读:313

ELISA试剂盒标准曲线样品检测时有几个问题需要注意:
一、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,否则后面的实验结果无从谈起。
二、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度,并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度。三、采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度,能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。
四、检测标准样品时,应按浓度递增顺序进行,以减少高浓度对低浓度的影响,提高准确性。
五、标准曲线的样品数一般为7个点,但至少要保证有5个点。
六、做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动,但一般来说,相关系数R至少要大于0.98,对于有些实验,至少要0.99甚至是0.999。
 

ELISA试剂盒血清灭活处理步骤:
① 选用与血清瓶同规格的对照瓶一个。
② 对照瓶内放入与血清等体积的水。
③ 温度预试:对照瓶内插入2—3支经挑选的温度计(保证测试温度的准确性),放入水浴箱中,接通电源,调节温度控制钮,使水浴箱温度所示温度保持在56℃。
④ 血清灭活:血清瓶与带温度计的对照瓶一齐放入水浴箱中,待温度计所示温度上升至56℃时, 定时30分钟。
⑤ 大瓶血清灭活后,进行分装。
⑥ 保存。

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