WB高性价比GAPDH内参抗体选择原则
时间:2017-05-04 阅读:1229
在WesternBloting实验中,也许存在总蛋白浓度测定不,或许蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作差错;这些差错可以经过测定每个样品中实际转到膜上的内参,比方内参GAPDH的含量来进行校对。当然除了GAPDH抗体,β-Actin抗体、β-Tubulin抗体等也是zui常见的内参抗体。GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)是参加糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基构成,分子量146kDa,检查条带大约在36kDa。GAPDH基因简直在所有组织中都高水平表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。
选择合适的GAPDH抗体显得尤为重要,首先GAPDH的WB检测条带大约为36kDa,因此对于一些待检测分子量大于40kDa或者小于30kDa的目的蛋白尤为合适。一般来说,国产的抗体在质量稳定性、效价等方面存在不足,但是进口品牌如Abcam、Millipore、CST等价格偏高,一般在¥3000/100ul左右。下面我们为您推荐三款GAPDH*抗体。Abbkine的Anti-GAPDH Monoclonal Antibody(货号A01020)是小鼠源的单抗,其效价很高,厂商推荐的WB起始稀释比率为1:1000,实际应用过程中,有使用1:10000或更高的报告,远远高于此稀释比率,说明其免疫效价很高,另外,其检测种属也很多,包括人、牛、猪、小鼠、大鼠等。上图为Abbkine的Anti-GAPDH MonoclonalAntibody(货号A01020)在不同细胞系内WB的检测结果。
产品名称及描述 | 货号 | 规格 | 产品说明 | |
Anti-GAPDH Mouse Monoclonal Antibody (2B5) | A01020 | 50ul/1ml | 详情 | |
GAPDH Polyclonal Antibody | ABP50152 | 30ul/200ul | 详情 | |
HRP Conjugated Anti-GAPDH Mouse Monoclonal Antibody ( 2B5) | A01025 | 50ul/1ml | 详情 |
Abbkine的HRP, Anti-GAPDH Mouse Monoclonal Antibody (2B5) (货号A01025)则是一款HRP直标的小鼠源单克隆GAPDH抗体,由于是HRP直接标记,因此不会受到二抗的干扰,在一些IP应用中非常合适,可有效排除IP-WB时的重链干扰。下图为Abbkine的GAPDH Monoclonal Antibody(货号A01020)抗体在石蜡包埋、福尔马林固定的切片上的应用。
更多GAPDH内参抗体以及其他如Actin、Tubulin等其他内参抗体,请。
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