价比的CCK-8检测试剂盒优缺点
时间:2017-03-01 阅读:546
如何根据优缺点选择合适的CCK-8检测试剂盒,首先我们需要了解的是Cell Counting Kit (CCK-8) 的优缺点,通过对各品牌的综合比较选择价比的CCK-8检测试剂盒。
CCK-8优缺点
CCK-8在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓*(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜产物(Formazan)。生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比。用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。
1、使用方便,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂;2、检测快速;
3、灵敏度高,甚至可以测定较低细胞密度;4、重复性优于MTT;5、对细胞毒性小;
6、为1瓶溶液,毋需预制,即开即用;
7、水溶性,不需换液,尤其适用于悬浮细胞1、与MTT相比,CCK-8和XTT的价格比较贵;
8、CCK-8试剂的颜色为淡红色,与含酚红的培养基颜色接近,不注意的话容易产生漏加或多加
优点
1、操作简单,比MTT,产生水溶性的Formazan,无需用DMSO溶解;
2、由于MTS被还原后生成的甲瓒产物颜色较深,吸光度值变异范围大,使测定更加敏感准确,阴/阳性的判断也比较容易;
3、快速,作用时间2-3小时为佳,而MTT需4小时;4、重复性好,还原产物稳定
缺点
1、由于MTT经还原所产生的1、试剂比较贵甲臜不溶于水,需被溶解后才能检测,对实验结果的准确性产生影响;
2、不太适合悬浮细胞活性检测
为什么将Cell Counting Kit (CCK-8) 作为细胞增殖与毒性检测佳选择:
§ 如下表,CCK-8法与其他细胞增殖/毒性检测方法的优势比较,结果不言而喻!
检测方法 | MTT法 | XTT法 | WST-1法 | CCK-8法 |
甲臜产物的水溶性 | 差(需加有机溶剂溶解后再检测) | 好 | 好 | 好 |
产品性状 | 粉末 | 2瓶溶液 | 溶液 | 1瓶溶液 |
使用方法 | 配成溶液后使用 | 现配现用 | 即开即用 | 即开即用 |
检测灵敏度 | 高 | 很高 | 很高 | 高 |
检测时间 | 较长 | 较短 | 较短 | zui短 |
检测波长 | 560-600nm | 420-480nm | 420-480nm | 430-490nm |
细胞毒性 | 高,细胞形态*消失 | 很低,细胞形态不变 | 很低,细胞形态不变 | 很低,细胞形态不变 |
试剂稳定性 | 一般 | 较差 | 一般 | 很好 |
批量样品检测 | 可以 | 非常适合 | 非常适合 | 非常适合 |
便捷程度 | 一般 | 便捷 | 便捷 | 非常便捷 |
* 细胞毒性非常低,因此加入WST-8显色后,可以在不同时间反复用酶标仪读数从而找到佳测定时间
* 酚红和血清对CCK法的检测不会造成干扰(扣除空白孔即可)
如何选择合适的CCK-8检测试剂盒?
目前市面上能提供的【CCK-8】细胞增殖/毒性检测试剂盒有国产分装或原产的,国产分装的CCK-8试剂盒在质量稳定性上有不足。而原产于国内实验室的CCK-8试剂盒有些具有较好的检测结果,在批次之间的稳定性上较难控制。至于*供应CCK-8试剂盒的进口品牌并不多,就连Abcam、Thermo,Sigma等等几个品牌都不能够提供CCK-8试剂盒,而其它品牌在性价比上远逊于Abbkine产品。
作为Abbkine品牌旗下细胞分析旗舰产品,Cell Counting Kit (CCK-8),Abbkine研发工程师为其倾注了大量的投入,不断摸索优化佳的配方,每一份努力只为让科研工作者更加简单,,稳定地获取珍贵的科研数据。
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