乳酸含含量lactic acid，LA试剂盒现货供应，咨询！

乳酸含含量lactic acid，LA试剂盒说明书
(??光光度法50T/24S)
测定意义
乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物，与糖代谢??脂类代谢??蛋白质代谢及??胞内能??
代谢密??相关，乳酸含??是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标??
测定原理
乳酸在乳酸脱氢酶的作用??生成丙酮酸，同时使NAD+还原生成NADH 和H+，H+传递给PMS
生成的PMSH2 还原INT 生成红色物质，在530nm 处有特征吸收峰??
自备实验用品及仪器
天平??研钵??离心机??可见??光光度????1 mL 玻璃比色皿??恒温水浴锅??
试剂组成和配制
提取液??液体55mL×1 瓶，4℃保存??
试剂一??液体8mL×1 瓶，4℃保存??
试剂????液体12mL×1 瓶，4℃保存??
试剂????粉剂×1 支，-20℃避光保存??临用前??入1.2mL 蒸馏水充??溶解??
试剂四??粉剂×1 瓶，4℃避光保存??临用前?? 12mL 蒸馏水充??溶解??
试剂五??粉剂×1 支，4℃避光保存??
标准品??液体1mL×1 支，4℃保存??
显色液??临用前根据用??按照提取液??V????试剂????V????试剂四??V????试剂五??m??=1??
0.3??3??15??mg??的比例充??混匀??
样本处理
1. 组????按照质????g????提取液体??(mL)为1??5~10 的比例??建议??取约0.1g，??入1mL
提取液????入提取液，冰浴匀浆后于4℃，12000g 离心10min，取??清测定??
2. ??胞??按照??胞数????104 个????提取液体????mL??为500~1000??1 的比例??建议500
万??胞??入1mL 提取液??，冰浴超声波破碎??胞????率300w，超声3 ??，间隔7 ??，
总时间3min????于4℃，12000g 离心10min，取??清测定??
3. 血清??直接测定??
测定操作
空白管 样品对照管 样品测定管 标准对照管 标准测定管
样品??mL?? 0.05 0.05
标准品??mL?? 0.05 0.05
H2O??mL?? 0.5 0.3 0.45 0.3 0.45
试剂一??mL?? 0.15 0.15
试剂????mL?? 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
显色液??mL?? 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3
充??混匀，于37℃反应30min，于1mL 玻璃比色皿，空白管调零，测定530nm 处吸光值，
??别记为A1，A2，A3，A4，△A 样=A2-A1??△A 标= A4-A3
??算公式
1. 按照蛋白含????算
LA 含????μmol/mg prot??=△A 样÷△A 标×C 标÷ Cpr
=2×△A 样÷△A 标÷ Cpr
2. 按照样本质????算
LA 含????μmol/g??=△A 样÷△A 标×C 标÷ W
=2×△A 样÷△A 标÷ W
3. 按照??胞数????算
LA 含????μmol/104 cell??=△A 样÷△A 标×C 标÷ ??胞数??
=2×△A 样÷△A 标÷ ??胞数??
4. 按照液体体????算
LA 含????μmol/mL??=△A 样÷△A 标×C 标
=2×△A 样÷△A 标
C 标??标准品浓度，2mmol/L ??W??样本质??，g/mL??Cpr??样本蛋白质浓度，mg/mL
注意??项
1. 空白管??标准对照管??标准测定管只需做一次??
2. 若吸光值超过1.2，请进行适当的稀释后再进行测定，并在??算公式中乘以稀释倍数??