江苏科特商贸有限公司

仪表网免费11

收藏

染色体结构显示与检测

时间:2015-07-27      阅读:258

1)染色体显带 
Q带法 
1. 漂洗:取经过干热预处理或已老化的染色体标本,置于pH6.0缓冲液中浸5~10分钟。 
2. 染色:浸入pH6.0GMQD染液中5~10分钟。 
3. 漂洗:浸入新鲜pH6.0缓冲液中漂洗两次,每次5分钟。 
4. 观察:向标本染色体面滴1~2滴新鲜缓冲液,覆以盖片(避免出气泡),置荧光显微镜下观察。 

G带法 
*-Giemsa混合显带法 
1.预处理:取中期染色体标本,置60℃~60℃温箱中2030分钟,或在37℃温箱隔夜,然后浸入0.025M磷酸缓冲液中,pH6.856℃温浴10分钟。 
2.消化和染色:用现配制的*-Giemsa混合液消化和染色1030分钟,混合液按如下比例配制: 
0.025 M 磷酸缓冲液pH6.8 73.0 ml 
甲醇 27.0 ml 
Giemsa干粉 50.0 mg 
0.25%* 0.30.4 ml 
3.封片:染色后用自来水冲洗,入蒸馏水漂洗数次、晾干、二甲苯透明2~3分钟,封入中性树脂中。 

Giemsa显带法 
1.预处理:将标本置入60~80℃温箱或烤箱中20~30分钟,亦可在37℃温箱过夜。 
2.*消化:用0.85%NaCl配制0.25%*溶液消化3~5分钟。 
3.染色:取出标本片,先直立于吸水纸上除去多余*液后,随即置入Giemsa染液中,染10分钟。 
4.封片:自来水洗,蒸馏水漂洗,晾干,二甲苯透明2~3分钟,封入中性树胶中。 

2)姐妹染色单体分化染色 
BUdR掺入和制片程序 
1BUdR培养液制备:先制备好含BUdR的培养液(zui终浓度为3~10微克/毫升)。 
2BUdR掺入:如用传代细胞,在末次传代后,改换用含BUdR的培养液培养。如为人末梢血细胞,一开始就用含BUdR培养液培养(培养瓶放在特制黑色木盒、黑布中或黑纸包裹)37℃温箱内培养。 
3.中止掺入与制片:待细胞经历两个细胞周期(人周围血细胞培养4872小时)

上一篇: 胎牛血清的主要成分 下一篇: 细胞培养的污染类型
提示

仪表网采购电话