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色谱柱的再生和维护方法

时间:2016-11-18      阅读:306

 

一、色谱柱的再生

色谱柱的再生因为色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,会出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰的现象,一般来说可能是柱效下降。

(1)反相柱的再生:

依次采用20~30倍的色谱柱体积的甲醇:水=10:90(V/V),乙腈,异丙醇作为流动相冲洗色谱柱,完成后再以相反顺序冲洗色谱柱。

(2)正相柱的再生:

依次以20~30倍色谱柱的体积的正己烷、异丙醇、二氯甲烷、甲醇作为流动相冲洗色谱柱,然后再以相反的顺序冲洗色谱柱。要注意上述溶剂必须严格脱水。

进行色谱柱再生时,应使用一个谦价的泵,我们建议不使用您的液相色谱仪上的泵。

注意:在对NH2改性的色谱柱进行再生时,由于NH2可能成铵根离子的形式存在,因此,应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗,然后再用水冲洗至碱溶液*流出。如果简单的有机溶剂/水的处理不能够*洗去硅胶表面吸附的杂质,用0.05M稀硫酸冲洗非常有效。

二、色谱柱的维护

1.使用预柱保护分析柱(硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度);

2.大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2~7.5,尽量不超过该色谱柱的pH范围;

3.避免流动相组成及极性的剧烈变化;

4.流动相使用前必须经脱气和过滤处理;

5.如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相,应在实验完毕柱子冲洗干净,并保存大乙腈中;

6.压力升高是需要更换预柱的信号。

(内容来源衡天力仪器网)

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