RESOLVOSIL BSA-7 牛血清蛋白手性柱 RESOLVOSIL BSA-7 手性柱,是牛血清蛋白BSA(Bovine Serum Albumin)共价键合在Nucleosil 300A-7um硅球上。优点是选择性非常高,如配合高灵敏度检测器,需要极少的进样量,细微的调整流动相比例,可以改变样品的保留,而且重现性很好。原理: RESOLVOSIL的分离原理是利用蛋白对小分子量的样品的手性选择得到的。BSA等一些蛋白能够交联大量具有手性氨基酸,并通过共价形式与HPLC使用的硅球键合,这样得到了具有光学活性的HPLC填料。并成功的运用在氨基酸及衍生物的手性拆分上。色谱柱使用条件:1) 由于RESOLVOSIL蛋白质改性类手性色谱柱的结果,容易受色谱条件(PH,离子强度,有机改性剂和温度)的影响。所以这些色谱条件的参数必须在每次检测时得到严格控制。同时每次对流动相体系的改变,都要保证足够的时间(几个小时)来平衡系统,保证实验结果的重现性。2) 流动相,RESOLVOSIL手性柱可以承受的水性缓冲液的PH值范围是5-8.缓冲盐可以使用磷酸盐或硼酸盐,浓度在0.01M-0.2M之间控制PH值,来改善样品的分离度。另外可以添加少量的(<5%)的正丙醇改变流动相的溶解性和表面张力。通常,样品的保留时间在正丙醇浓度1-2%之间变化很大,但正丙醇浓度>5%时对保留时间没有影响。注意:RESOLVOSIL 手性柱是不能在常规的反相流动相(乙腈/甲醇)中使用。在由常规反相操作切换RESOLVOSIL 手性柱时一定要*清洗系统。3) 色谱条件对RESOLVOSIL蛋白质改性类手性色谱柱的结果有很大影响保留时间和分离度,受多种因素(PH,缓冲盐浓度,表面张力等)影响流动相的选用上应考虑:容易得到,成本低,无毒和不影响生物活性。紫外,荧光和电化学检测器都与RESOLVOSIL 手性柱是匹配的。水性样品可以直接进样。RESOLVOSIL手性柱的机械强度高,能够承受压力在300bar(4200psi)下的较高流速。4) 承载量:为保证的分离度,RESOLVOSIL 手性柱每次进样浓度应低于0.2umol。更高的进样浓度都会造成色谱柱过载而引起分辨率下降。为延长柱寿命,在分析生物样品时,建议使用反相流动相,保护柱或者阀切换技术。5) 稳定性:由于RESOLVOSIL手性柱是在BSA上键合小分子官能团并共价键合在硅球上。色谱柱性能的稳定性决定于BSA蛋白结构的稳定,为避免蛋白的变性,应严格遵守以上色谱使用条件。长时间保存时,应使用含叠氮化合物的水溶液平衡色谱柱,并将色谱柱放在冰箱中低温保存。RESOLVOSIL BSA-7 |