沪鼎生物|浅谈一下细胞培养基的小知识吧~
时间:2023-07-06 阅读:378
细胞培养现在已成为应用于生命科学的主要技术之一,它是从生物机体中取出部分组织分散成单个细胞或直接从机体取出单个细胞,并将它们在有利于生长的人工环境中培养的统称。细胞最适生长的基本环境是适当的温度,良好的细胞附着基质和适当的培养液和培养箱,能够保持正确的pH值和渗透压。
在动物细胞培养中最重要和最关键的一步是选择适当的培养液用于体外培养。生长培养基或培养基是液体或凝胶状态的,设计用于支持微生物、细胞或小的植株生长。培养基是控制最佳的细胞生长最重要和最复杂的因素。细胞培养基通常包括适当的细胞能量来源和调节细胞周期的化合物。一个典型的培养基还需要补充氨基酸,维生素,无机盐,葡萄糖,和血清,以提供生长因子、激素、和附着因子。除了营养外,培养基也有助于保持培养体系中的pH值和渗透压平衡。
一、细胞培养基的类型:
动物细胞的培养可以使用chun天然的培养基或人工/合成的培养基混合一些天然产物。
1. 天然培养基
天然培养基仅由天然生成的生物液体组成。天然培养基适用于多种不同的动物细胞培养。但由于缺乏对这些天然培养基确切成分的认识,使用天然培养基的主要缺点是可重复性差。
2. 人工培养基
人工培养基通过人为地加入一些营养物质(有机的和无机的)、维生素、盐、O2和CO2气体、血清蛋白、碳水化合物、辅因子,制备成人工或合成的培养基。
不同的人工培养基被分别设计用于下面的几个用途:
1)及时生存(平衡的盐溶液,有特定的pH和渗透压);
2)长时间生存(ping衡盐溶液辅以各种配方的有机化合物和/或血清) ;
3)不确定生长 ;
4)特定功能。
二、培养基中的血清:
血清是白蛋白、生长因子和生长抑制剂的复杂混合体。血清是细胞培养基中最重要的组分之一,作为氨基酸、蛋白质、维生素(特别是zhi溶性维生素,如A,D,E,和K)、碳水化合物、脂质、激素、生长因子、矿物质和微量元素的来源。通常会在培养基中使用胎儿和小牛来源的血清来支持细胞生长。胎儿血清含有丰富的生长因子,适当细胞克隆和难以培养的细胞的生长。胎儿血清被用于接触抑制研究,因为它较低的生长促进特性。正常的生长培养基往往包含2-10%的胎儿血清。
培养基中补充血清具有以下作用:
1)血清未细胞提供了基本的营养成分(在溶液中和结合到蛋白质上的)。
2)血清为生长促进和特定细胞功能提供多种生长因子和激素。
3)提供了多种结合蛋白质,如白蛋白、转铁蛋白,可以携带其他成分进入细胞。例如:白蛋白可携带脂类、维生素、激素等进入细胞。
4)还可提供蛋白质,如纤连蛋白,促进细胞附着到基质上。它提供扩散因子帮助细胞在分裂前扩散。
5)提供蛋白酶抑制剂,保护细胞免受降解。
6)提供矿物质,如Na+,K+,Zn2 +,Fe2 +等。
7)增加培养基的粘性,因此保护细胞在悬浮培养搅拌过程中免受机械损伤。
8)还可以作为一种缓冲液。
由于存在生长因子和酶抑制剂,血清在细胞培养中的作用是非常复杂的。除了提供各种功能,在组织培养中使用血清也存在优缺点。
1.培养基中使用血清的优点:
①血清包含多种生长因子和激素,可以刺激细胞生长和发挥功能
②可帮助细胞附着
③可作为扩散因子
④作为缓冲剂帮助维持生长培养基的pH值
⑤可作为结合蛋白
⑥减小机械损伤或由搅拌造成的损伤
2.培养基中使用血清的缺点:
①血清成分缺乏均一性
②在使用每一批前都需要检测以确保质量
③可能包含一些生长抑制因子
④增加污染的可能
⑤培养基中存在血清可能干扰细胞培养产物的纯度和分离