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豚鼠ELISA试剂盒之加底物显色法

时间:2014-02-19      阅读:369

   豚鼠ELISA试剂盒本法主要用于对病原体抗体的检测而进行传染病的诊断。间接法的优点是只要变换包
被抗原就可利用同一酶标抗抗体建立检测相应抗体的方法。
   间接法成功的关键在于抗原的纯度。虽然有时用粗提抗原包被也能取得实际有效的结
果,但应尽可能予以纯化,以提高试验的特异性。特别应注意除去能与一般健康人血清发
生反应的杂质,例如以E.Coli为工程酶的重组抗原,如其中含有E.Coli成份,很可能与受过
E.Coli感染者血甭中的抗E.Coli抗体发生反应。抗原中也不能含有与酶标抗人Ig反应的物
质,例如来自人血浆或人体组织的抗原,如不将其中的Ig去除,试验中也发生假阳性反
应。另外如抗原中含有无关蛋白,也会因竟争吸附而影响包被效果。
   间接法中另一种干扰因素为正常血清中所含的高浓度的非特异性。病人血清中受检的
特异性IgG只占总IgG中的一小部分。IgG的吸附性很强,非特异IgG可直接吸附到固相载体
上,有时也可吸附到包被抗原的表面。因此在间接法中,抗原包被后一般用无关蛋白质
(例如牛血清蛋白)再包被一次,以封闭(blocking)固相上的空余间隙。另外,在检
测过程中标本须先行稀释(1:40~1:200),以避免过高的阴性本底影响豚鼠ELISA试剂盒结果的判断。

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