小鼠ELISA试剂盒揭示小鼠气道反应性的检测
时间:2015-04-07 阅读:245
小鼠ELISA试剂盒揭示小鼠气道反应性的检测,目前国内在对支气管哮喘 ( 简称哮喘) 小鼠的评价上多数仅仅立足于气道炎性指标 ,在气道反应性的检测方面近几年才起步 ,而且是用有创的方法。我所从国外引进了动物*检测的* 。*后再测定动物气道阻力的有创法是评价动物气道反应性的经典方法 。 *法则不需*等繁琐的步骤 ,在动物处于自然状态下就可以直接测定其气道反应性 ,而且每次可以同时检测多只小鼠 ,具有较大的*性 ,但能否取代有创法尚需更多的数据 。 因此 ,我们有必要探讨其与有创法的相关性 ,判定其是否能够有效检测动物的气道反应性 ,以期建立哮喘小鼠气道反应性的*检测方法 。
仪器小鼠**和有创*,实验动物SP F 级 BALB/ c 雌鼠 ,5~6 周龄 ,体质量 18~20 g 。
哮喘模型的建立方法
实验第 0 天 、 第 7 天和第 14 天行腹腔注射致敏 :模型组每次给予 20μ g OV A + 150μ l Al (O H) 3 + 50 μ l N S( 100 mg/ L ) 混悬液 ; 对照组给予 200 μ l N S 。 实验第 28 天 、 第 29 天和第 30 天行滴鼻激发 ; 模型组每次给予50 μ l OV A2 N S ( 2 g/ L ) 滴鼻 ,对照组给予 50 μ l N S 。
气道反应性的检测
实验第 32 天 , 首先 , 连接好 B u xco **并定标 。将自然状态下的 BALB/ c 小鼠置入体描箱中 ,先测定基础 Pe n h 值 ; 随后用 Mc h 激发 , 浓度由低到高依次为 0 、 0 . 20 、 0 . 39 、 0 . 78 、 1 . 56 、 3 . 12 、 6 . 25 、12 . 5 、 25 和 50 g/ L ,记录此时的 Pe n h 值 ,每次雾化吸入 2 mi n ,记录3 mi n 。 有创组则是将小鼠行*后用 B u xco 有创*测定其 RL 值 。
气道反应性检测后行支气管肺泡灌洗 ( PB S 0 . 8 ml × 3 次) , 回收支气管肺泡灌洗液 , 离心 , 细胞沉淀重悬 ,取部分计算细胞总数 ,余下部分制备涂片 , H E 染色后行细胞分类计数 , 每张涂片计数 400 个细胞 , 记录各种细胞数目。
实验结果以 ? x ±s 表示为进行*组和有创组气道反应性相关分析,分别将每个 Mc h 激发浓度下的Pe n h 与 RL 组转换为与 N S 激发的基础值的百分比 ( Mc h 激发的 Pe n h 值或 RL 值/ N S 激发的 Pe n h 值或 RL值 × 100 %) 来表示 。 采用 SPSS 11 . 0统计软件分析 ,两组样本均数进行 t 检验或相关分析 , P < 0 . 05 、P <0 . 01表示差异有统计学意义 。