C18色谱柱的使用说明
时间:2015-02-04 阅读:1844
一、色谱柱使用前注意事项
色谱柱的储存液无特殊说明,均为评价报告所示的流动相。在使用前,一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。对于在正相条件下评价的色谱柱,如果使用的条件为反相时,请用一个中介流动相(如异丙醇)先置换掉柱内的储存液,然后再应用于反相条件,否则,会对色谱柱造成极大的伤害,将会明显地减少色谱柱的使用寿命。在反相色谱柱中,如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂,一定不要把色谱柱直接接上,应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过度一下,否则缓冲液中的盐在高浓度的有机中很容易析出,而使色谱柱堵塞,无法恢复。
二、色谱柱的使用方向
色谱柱标签上的箭头所示方向是装填和评价时流动相流动的方向,使用过程中流动相的方向也应按此方向。
三、流动相
流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能地使用色谱纯,或至少是分析纯试剂;配流动相的水是超纯水或者是全玻璃器皿的双蒸水。如果将所配得流动相再经过0.45或0.22μm的滤膜过滤一次则更好,这一点对含盐的流动相尤为重要。另外,装流动相的溶器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。总之,必须保证所使用的流动相和色谱系统是足够的清洁。
四、样品
样品也要尽可能的清洁,同样可选用样品过滤器或样品预处理柱(SPE)对样品进行预处理;若样品不便处理,要使用保护柱。在用正相色谱法分析样品时,如无特殊要求,所有的溶剂和样品都应严格脱水。