LC-3000测定面粉中偶氮甲酰胺含量液相色谱仪

新年伊始，洋快餐赛百味就因面包含有偶氮二甲酰胺(azodicarbonamide)陷入了食品安全危机，据外媒报道，该成分通常拿来作为橡胶鞋底和瑜伽垫的原料。中国台湾“卫福部食药署副署长”姜郁美接受媒体采访时表示，偶氮二甲酰胺具有氧化和漂白的效果，通常添加在面粉中作为增筋剂，加强面筋的弹性与韧性。亦可作为焙烤食品快速发酵剂。

据记者了解,目前*食品法典委员会(Codex)及美国FDA均将其列为合法食品添加物，但欧盟与澳大利亚禁止使用这项化学物质，因为可能会引致呼吸性疾病和过敏。而根据FDA的限制，每公斤面包偶氮二甲酰胺含量不得超过45毫克，就不会影响身体健康。目前，我国GB2760《食品添加剂使用卫生标准》(含1997～2006年增补品种)规定小麦粉中ADAzui大使用量为0.045g/kg。虽然我国已规定偶氮甲酰胺在面粉中的zui大使用量，但目前还未见有关于面粉中ADA快速检测方法的报道，也无相关的检测标准。本公司建立了LC-3000面粉中偶氮甲酰胺含量测定液相色谱仪的分析方法，该方法前处理简单，灵敏度高，能够广泛应用于面粉中ADA的检测。

面粉中偶氮甲酰胺(azodicarbonamide，ADA)用丙酮提取，提取液氮吹浓缩后用20mmol/L乙酸铵的水溶液定容，并用正己烷脱脂。样液供高效液相色谱仪测定，外标法定量。方法的线性范围为0～50mg/L(r=1.000)，定量下限为1.0mg/kg。在面粉基质中分别添加1.0、2.0、50.0mg/kg 3个水平的偶氮甲酰胺标准品，方法的回收率为80～92%，相对标准偏差小于7%。

一、LC-3000测定面粉中偶氮甲酰胺含量液相色谱仪仪器与试剂

鲁创LC-3000型高效液相色谱仪，配自动进样器和二极管阵列检测器(DAD)；振荡器(SA400型，日本Yamato公司)；离心机(Universal 32型，德国Hettich公司)；旋涡混合器(M37610-33型，美国Barnstead公司)；吹氮浓缩仪(NC-2012型，鲁创分析仪器有限公司)。

水为去离子水；乙腈、二甲基甲酰胺为色谱纯；丙酮、正己烷为分析纯；滤膜(0.20μm， 水相)；偶氮甲酰胺标准品(纯度大于99.0%)购自美国Chemservice公司。

二、 标准溶液配制

准确称量适量标准物质，用二甲基甲酰胺溶解并定容，配制成1000mg/L标准储备液，分装于液相小瓶中，在-80℃冰箱中保存，2周内使用。根据需要用20mmol/L乙酸铵的水溶液配制标准工作溶液。

三、样品处理方法

称取面粉1g(精确到0.001g)于50mL塑料离心管中，加入10mL丙酮，室温下振荡提取15min，5000r/min离心5min。取上层5mL丙酮于40℃氮吹至近干，用20mmol/L乙酸铵的水溶液定容至1mL，再加入1mL正己烷，旋涡振荡。静置分层，取下层水溶液过滤膜，立即进行液相分析。

四、液相色谱条件

色谱柱：Nucleosil100-5CN，250mm×416mm(i.d.)，5μm；柱温：25℃；流速：0.8mL/min；等度洗脱：20mmol/L乙酸铵的水溶液-乙腈(体积比80∶20)；检测波长：245nm；进样量：10μL。

适合用户：各面粉厂，食品生产公司，方便面公司，技术*（站）

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