关健词：高温 灭菌 记录仪  RC-T200   

      高温对微生物有明显的致死作用。所以，应用高温进行灭菌是比较确实可靠而且也是常用的物理方法。高温可以灭活包括细菌及繁殖体、真菌、病毒和抵抗力zui强的细菌芽抱在内的一切微生物。   

　　1 ．高温消毒或灭菌的机制   

　　高温杀灭微生物的基本机制是通过破坏微生物蛋白质、核酸的活性导致微生物的死亡。蛋白质构成微生物的结构蛋白和功能蛋白。结构蛋白主要包括构成微生物细胞壁、细胞膜和细胞浆内含物等．功能蛋白构成细菌的酶类。湿热对细菌蛋白质的破坏机制是通过使蛋白质分子运动加速，互相撞击，致使肤链连接的副键断裂，使其分子由有规律的紧密结构变为无秩序的散漫结构，大量的疏水基暴露于分子表面，并互相结合成为较大的聚合体而凝固、沉淀，干热灭菌主要通过热对细菌细胞蛋白质的氧化作用，并不是蛋白质的凝固。因为干燥的蛋白质加热到100 ℃ 也不会凝固。细菌在高温下死亡加速是由于氧化速率增加的缘故。无论是干热和湿热对细菌和病毒的核酸均有破坏作用，加热可使RNA 单链的磷酸二酯键断裂；而单股DNA 的灭活是通过脱嘌呤。实验证明，单股RNA 的敏感性高于单股的DNA 对热的敏感性，但都随温度的升高而灭活速率加快。   

　　2 ．高温消毒和灭菌的常用方法   

　　方法主要分为干热消毒灭菌和湿热消毒灭菌．   

　　（ 1 ）干热消毒和灭菌法   

　　① 灼烧或焚烧消毒法灼烧是指直接用火焰灭菌，适用于笼具、地面、墙壁以及兽医站使用的接种针、剪、刀、接种环等不怕热的金属器材，可立即杀死全部微生物。在没有其他灭菌方法的情况下，对剖检器械也可灼烧灭菌。接种针、环、棒以及剖检器械等体积较小的物品可直接在酒精灯火焰上或点燃的酒精棉封火焰上直接灼烧，笼具、地面、墙壁的灼烧必须借助火焰消毒器进行。焚烧主要是对病畜尸体、垃圾、污染的杂草、地面和不可利用的物品器材采用燃烧的办法，点燃或在焚烧炉内烧毁，从而消灭传染源。体积较小，易燃的杂物等可直接点燃；体积较大,不易燃烧的病死畜禽尸体、污染的垃圾和粪便等可泼上汽油点燃，也可在焚烧炉或架在易燃的物品上焚烧。焚烧处理是zui为*的消毒方法。   

　　② 热空气灭菌法即在干燥的情况下，利用热空气灭菌的方法。此法适用于干燥的玻璃器皿，如烧杯、烧瓶、吸管、试管、离心管、培养皿、玻璃注射器、针头、*、凡士林及液体石蜡等的灭菌。在干热的情况下，由于热的穿透力较低，灭菌时间较湿热法长。干热灭菌时，一般细菌的繁殖体在100 ℃ 经1.5 小时才能杀死，芽孢则需在140 ℃ 经3 小时才能被杀死。真菌的孢子100 ～115 ℃ 经1.5 小时才能杀死。干热灭菌法是在特别的电热干烤箱内进行的。灭菌时，将待灭菌的物品放入烘烤箱内，使温度逐渐上升到160 ℃ 维持2 小时，可以杀死全部细菌及其芽孢。干热灭菌时注意以下5 点。   

　　middot; 消毒灭菌器械应洗净后再放入电烤箱内，以防附着在器械上面的污物炭化。玻璃器材灭菌前应洗净并干燥，勿与烤箱底壁直接接触，灭菌结束后，应待烤箱温度降至40 ℃ 以下再打开烤箱，以防灭菌器具炸裂。   

　　．物品包装不宜过大，干烤物品体积不能超过烤箱容积的2 / 3 , 物品之间应留有空隙，有利于热空气流通。粉剂和油剂不宜太厚（ 小于1.3 厘米），有利于热的穿透。   

　　．棉织品、合成纤维、塑料制品、橡胶制品、导热差的物品及其他在高温下易损坏的物品，不可用干烤灭菌。灭菌过程中，高温下不得中途打开烤箱，以免引燃灭菌物品。   

　　．灭菌时间计算应从温度达到要求时算起。   

　　（ 2 ）湿热消毒和灭菌法湿热灭菌法是灭菌效力较强的消毒方法，应用较为广泛。常用的有如下几种。   

　　① 煮沸消毒利用沸水的高温作用杀灭病原体，是使用较早的消毒方法之一，方法简单、方便、安全、经济、实用、效果可靠。常用于针头、金属器械、工作服、工作帽等物品的消毒。煮时消毒温度接近100 ℃ ，10 ～20 分钟可以杀死所有细菌的繁殖体，若在水中加入5 % ～10 ％的肥皂或碱或1 ％的碳酸钠，使溶液中pH值偏碱性，可使物品上的污物易于溶解，同时还可提高沸点，增强杀菌力。水中若加入2 %～5 ％的石炭酸，能增强消毒效果，经15 分钟的煮沸可杀死炭疽杆菌的芽孢。应用本法消毒时，要掌握消毒时间，一般以水沸腾时算起，煮沸20 分钟左右，对于寄生虫性病原体，消毒时间应加长。   

　　② 流通蒸汽消毒又称常压蒸汽消毒，此法是利用蒸笼或流通蒸汽灭菌器进行消毒灭菌。一般在100 ℃ 加热30 分钟，可杀死细菌的繁殖体，但不能杀死芽孢和霉菌孢子，因此常在100 ℃ 30分钟灭菌后，将消毒物品置于室温下，待其芽孢萌发，第二天、第三天再用同样的方法进行处理和消毒。这样连续3 天3 次处理，即可保证杀死全部细菌及其芽孢。这种连续流通蒸汽灭菌的方法，称为间歇灭菌法。此消毒方法常用于易被高温破坏的物品如鸡蛋培养基、血清培养基、牛乳培养基、糖培养基等的灭菌。若为了不破坏血清等，还可用较低一点温度如70 ℃ 加热1小时，连续6 次，也可达到灭菌的目的。   

　　③ 巴氏消毒法此法常用于啤酒、葡萄酒、鲜牛奶等食品消毒以及血清、疫苗的消毒，主要是消毒怕高温的物品。温度一般控制在61 ～80 ℃ 。根据消毒物品性质确定消毒温度，牛奶62.8 ～65.6 ℃ ，血清56 ℃ ，疫苗56 ～60 ℃ 。牛奶消毒，有低温长时间巴氏消毒法（61 ～63 ℃ ，加热30 分钟），或高温短时间巴氏消毒翻（ 71 ～72 ℃ 加热15 秒钟），然后迅速冷却至10 ℃ 左右。这可使牛奶中细菌总数减少90%以上，并杀死其中的全部病原菌   

　　④ 高压蒸汽灭菌通常情况下，1 个大气压100℃ ，当超过1 个大气压时，则水的沸点超过100℃,压力越大,水的沸点越高。高压灭菌就是根据这一原理，在一个密封的金属容器内，通过加热来增加蒸汽压力、提高水蒸气温度，达到短时间灭菌的效果。   

　　高压蒸汽灭菌具有灭菌速度快，效果可靠的特点，常用于玻璃器皿、纱布、金属器械、培养基、橡胶制品、生理盐水、针具等消毒灭菌。   

　　高压蒸汽灭菌应注意如下几点。   

　　．排净灭菌器内冷空气，排气不充分易导致灭菌失败。一般当压力升至2 磅／平方英寸或3 磅／平方英寸时，缓缓打开气门，排出灭菌器中的冷空气，然后再关闭其门，使灭菌器内的压力再度上升。   

　　合理计算灭菌时间，要从压力升到所需压力时计算。   

　　．消毒物品的包装和容器要合适，不要过大、过紧，在否则不利于空气穿透。   

　　．注意安全操作，检查各部件是否灵敏，控制加热速度，防止空气超高热。   

　　3 ．影响的因素   

　　（ l ）微生物方面   

　　① 微生物的类型由于不同的微生物具有不同的生物学与理化特性，故不同的微生物对热的抵抗力不同，如嗜热菌由于长期生活在较高的温度条件下，故其对高温的抵抗力较强：无芽孢细菌、真菌和细菌的繁殖体以及病毒对高温抵抗力较弱，一般在60 ～70 ℃ 下短时间内即可死亡。细菌的芽孢和真菌的孢子均比其繁殖体耐高温，细菌芽孢常常可耐受较长时间的煮沸，如肉毒梭菌孢子能耐受6 小时的煮沸：破伤风杆菌芽孢能耐受3 小时的煮沸。   

　　② 细菌的菌龄及发育时的温度在对数生长期的细菌对热的抵抗力相对较小，老龄菌的抵抗力较大。一般在zui适温度下形成的芽孢比其在zui高或zui低温度下产生的芽孢抵抗高温的能力要大。如肉毒梭菌在24～ 37 ℃ 范围内，随着培养温度的升高，其芽孢对热的抵抗力逐渐加强，但在41 ℃ 时所形成的芽孢对热的抵抗力较37 ℃ 时形成的芽孢的抵抗力为低。   

　　③ 细菌的浓度细菌和芽孢在加热时，并不是在同一时间内全部被杀灭，一般来说，细菌的浓度愈大，杀死zui后的细菌所需要的时间也愈长。   

　　（ 2 ）介质（水）的特性   

　　水作为消毒杀菌的介质，在一定范围内，其含量越多，杀菌所需要的温度越低，这是由于水分具有良好的传热性能，能促进加热时菌体蛋白的凝固，使细菌死亡。芽孢之所以耐热，是由于它含水分比繁殖体要少。若水中加入2%～4%的石炭酸可增强杀菌力。细菌在非水的介质中比水作为介质时对热的抵抗力大。如热空气条件下，杀菌所需温度要高，时间要长。在浓糖和盐溶液中细菌脱水，对热的抵抗力增强。   

　　（ 3 ）加热的温度和时间许多无芽孢杆菌（如伤寒杆菌、结核杆菌等）在62 ～63 ℃ 下，20～30 分钟死亡。大多数病原微生繁殖体在60 ～70 ℃ 条件0.5 小时内死亡；一般细菌的繁殖100 ℃ 下数分钟内死亡。  

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