显微镜是由一个透镜或几个透镜的组合构成的一种光学仪器，是人类进入原子时代的标志。主要用于放大微小物体成为人的肉眼所能看到的仪器。显微镜分光学显微镜和电子显微镜：光学显微镜是在1590年由荷兰的杨森父子所*。现在的光学显微镜可把物体放大1600倍，分辨的zui小极限达0.1微米，国内显微镜机械筒长度一般是160mm。国内主要生产厂家有重庆光电等等......
 

　　光学显微镜的种类很多，除一般的外，主要有：
 

　　①暗视野显微镜：一种具有暗视野聚光镜，从而使照明的光束不从*部分射入，而从四周射向标本的显微镜。
 

　　②荧光显微镜：以紫外线为光源，使被照射的物体发出荧光的显微镜。电子显微镜是在1931年在德国柏林由克诺尔和哈罗斯卡首先装配完成的。这种显微镜用高速电子束代替光束。由于电子流的波长比光波短得多，所以电子显微镜的放大倍数可达80万倍，分辨的zui小极限达0.2纳米。1963年开始使用的扫描电子显微镜更可使人看到物体表面的微小结构。
 

　　■主要用途
 

　　显微镜被用来放大微小物体的图像。一般应用于对生物、医药、微观粒子等观测。
 

　　（1）利用微微动载物台之移动，配全目镜之十字座标线，作长度量测。
 

　　（2）利用旋转载物台与目镜下端之游标微分角度盘，配全合目镜之址字座标线，作角度量测，令待测角一端对准十字线与之重合，然再让另一端也重合。
 

　　（3）利用标准检测螺纹的节距、节径、外径、牙角及牙形等尺寸或外形。
 

　　（4）检验金相表面的晶粒状况。
 

　　（5）检验工件加工表面的情况。
 

　　（6）检测微小工件的尺寸或轮廓是否与标准片相符。

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【仪器结构】

　　■光学显微镜结构
 

　　普通光学显微镜的构造主要分为三部分：机械部分、照明部分和光学部分。
 

　　◆机械部分
 

（1）镜座：是显微镜的底座，用以支持整个镜体。
 

　　（2）镜柱：是镜座上面直立的部分，用以连接镜座和镜臂。
 

　　（3）镜臂：一端连于镜柱，一端连于镜筒，是取放显微镜时手握部位。
 

　　（4）镜筒：连在镜臂的前上方，镜筒上端装有目镜，下端装有物镜转换器。
 

　　（5）物镜转换器（旋转器）：接于棱镜壳的下方，可自由转动，盘上有3－4个圆孔，是安装物镜部位，转动转换器，可以调换不同倍数的物镜，当听到碰叩声时，方可进行观察，此时物镜光轴恰好对准通光孔中心，光路接通。转换物镜后，不允许使用粗调节器，只能用细调节器，使像清晰。
 

　　（6）镜台（载物台）：在镜筒下方，形状有方、圆两种，用以放置玻片标本，*有一通光孔，我们所用的显微镜其镜台上装有玻片标本推进器（推片器），推进器左侧有弹簧夹，用以夹持玻片标本，镜台下有推进器调节轮，可使玻片标本作左右、前后方向的移动。
 

　　（7）调节器：是装在镜柱上的大小两种螺旋，调节时使镜台作上下方向的移动。
 

　　①粗调节器（粗螺旋）：大螺旋称粗调节器，移动时可使镜台作快速和较大幅度的升降，所以能迅速调节物镜和标本之间的距离使物象呈现于视野中，通常在使用低倍镜时，先用粗调节器迅速找到物象。
 

　　②细调节器（细准焦螺旋）：小螺旋称细调节器，移动时可使镜台缓慢地升降，多在运用高倍镜时使用，从而得到更清晰的物象，并借以观察标本的不同层次和不同深度的结构。
 

　　◆照明部分
 

　　装在镜台下方，包括反光镜,集光器。
 

　　（1）反光镜：装在镜座上面，可向任意方向转动，它有平、凹两面，其作用是将光源光线反射到聚光器上，再经通光孔照明标本，凹面镜聚光作用强，适于光线较弱的时候使用，平面镜聚光作用弱，适于光线较强时使用。
 

　　（2）集光器（聚光器）位于镜台下方的集光器架上，由聚光镜和光圈组成，其作用是把光线集中到所要观察的标本上。
 

　　①聚光镜：由一片或数片透镜组成，起汇聚光线的作用，加强对标本的照明，并使光线射入物镜内，镜柱旁有一调节螺旋，转动它可升降聚光器，以调节视野中光亮度的强弱。

　　②光圈（虹彩光圈）：在聚光镜下方，由十几张金属薄片组成，其外侧伸出一柄，推动它可调节其开孔的大小，以调节光量。
 

　　◆光学部分
 

　　（1）目镜：装在镜筒的上端，通常备有2－3个，上面刻有5×、10×或15×符号以表示其放大倍数，一般装的是10×的目镜。
 

　　（2）物镜：装在镜筒下端的旋转器上，一般有3－4个物镜，其中zui短的刻有“10×”符号的为低倍镜，较长的刻有“40×”符号的为高倍镜，zui长的刻有“100×”符号的为油镜，此外，在高倍镜和油镜上还常加有一圈不同颜色的线，以示区别。
 

　　显微镜的放大倍数是物镜的放大倍数与目镜的放大倍数的乘积，如物镜为10×，目镜为10×，其放大倍数就为10×10=100。
 

　　■电子显微镜结构
 

　　电子显微镜由镜筒、真空系统和电源柜三部分组成。镜筒主要有电子枪、电子透镜、样品架、荧光屏和照相机构等部件，这些部件通常是自上而下地装配成一个柱体；真空系统由机械真空泵、扩散泵和真空阀门等构成，并通过抽气管道与镜筒相联接；电源柜由高压发生器、励磁电流稳流器和各种调节控制单元组成。
 

　　◆电子透镜
 

　　电子透镜是电子显微镜镜筒中zui重要的部件，它用一个对称于镜筒轴线的空间电场或磁场使电子轨迹向轴线弯曲形成聚焦，其作用与玻璃凸透镜使光束聚焦的作用相似，所以称为电子透镜。现代电子显微镜大多采用电磁透镜，由很稳定的直流励磁电流通过带极靴的线圈产生的强磁场使电子聚焦。
 

　　◆电子枪
 

　　电子枪是由钨丝热阴极、栅极和阴极构成的部件。它能发射并形成速度均匀的电子束，所以加速电压的稳定度要求不低于万分之一。

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【成像原理】

　　光学显微镜成像原理
 

　　使用无限远光学系统的显微镜主要由物镜、管镜和目镜组成。标本经物镜和管镜放大后，形成放大倒立的实象；实象经目镜再次放大后，形成放大的虚象。
 

　　标本（AB）在物镜（Lo）焦点上，通过物镜（Lo）和管镜（Le）在象方形成放大倒立的实象（A’B’）；靠近人眼一方的目镜（Le）对中间象（A’B’）再次放大，在明视距离（对人眼来说约为250mm）处形成一个虚象（A”B”）。
 

　　人眼通过显微镜所观察到的象就是一个被放大了的虚象A”B”。
 

　　电子显微镜成像原理
 

　　电子显微镜是根据电子光学原理，用电子束和电子透镜代替光束和光学透镜，使物质的细微结构在非常高的放大倍数下成像的仪器。
 

　　电子显微镜的分辨能力以它所能分辨的相邻两点的zui小间距来表示。20世纪70年代，透射式电子显微镜的分辨率约为0.3纳米（人眼的分辨本领约为0.1毫米）。现在电子显微镜zui大放大倍率超过300万倍，而光学显微镜的zui大放大倍率约为2000倍，所以通过电子显微镜就能直接观察到某些重金属的原子和晶体中排列整齐的原子点阵。

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【修理维护】

　　■显微镜的维护
 

　　1、经常性的维护
 

　　（１）防潮如果室内潮湿，光学镜片就容易生霉、生雾。镜片一旦生霉，很难除去。显微镜内部的镜片由于不便擦拭，潮湿对其危害性更大。机械零件受潮后，容易生锈。为了防潮，存放显微镜时，除了选择干燥的房间外，存放地点也应离墙、离地、远离湿源。显微镜箱内应放置１～２袋硅胶作干燥剂。并经常对硅胶进行烘烤。在其颜色变粉红后，应及时烘烤，烘烤后再继续使用。
 

　　（２）防尘光学元件表面落入灰尘，不仅影响光线通过，而且经光学系统放大后，会生成很大的污斑，影响观察。灰尘、砂粒落入机械部分，还会增加磨损，引起运动受阻，危害同样很大。因此，必须经常保持显微镜的清洁。
 

　　（３）防腐蚀 显微镜不能和具有腐蚀性的化学试剂放在一起。如硫酸、盐酸、强碱等。
 

（４）防热 防热的目的主要是为了避免热胀冷缩引起镜片的开胶与脱落。
 

　　２、光学系统的擦拭
 

　　平时对显微镜的各光学部分的表面，用干净的毛笔清扫或用擦镜纸擦拭干净即行。在镜片上有抹不掉的污物、油渍或手指印时，镜片生霉、生雾以及长期停用后复用时，都需要*行擦拭再使用。
 

　　（１）擦拭范围 目镜和聚光镜允许拆开擦拭。物镜因结构复杂，装配时又要专门的仪器来校正才能恢复原有的精度，故严禁拆开擦拭。
 

　　拆卸目镜和聚光镜时，要注意以下几点：
 

　　a、小心谨慎。
 

　　b、拆卸时，要标记各元件的相对位置（可在外壳上划线作标记）、相对顺序和镜片的正反面，以防重装时弄错。
 

　　c、操作环境应保持清洁、干燥。拆卸目镜时，只要从两端旋出上下两块透镜即可。目镜内的视场光栏不能移动。否则，会使视场界线模糊。聚光镜旋开后严禁进一步分解其上透镜。因其上透镜是油浸的，出厂时经过良好的密封，再分解会破坏它的密封性能而损坏。
 

　　２．擦拭方法先用干净的毛笔或吹风球除去镜片表面的灰尘。然后用干净的绒布从镜片中心开始向边缘作螺旋形单向运动。擦完一次把绒布换一个地方再擦，直至擦净为止。如果镜片上有油渍、污物或指印等擦不掉时，可用柳枝条裹上脱脂棉，蘸少量酒精和乙醚混合液（酒精80％，乙醚20％）擦拭。如果有较重的霉点或霉斑无法除去时，可用棉签蘸水润湿后粘上碳酸钙粉（含量为99％以上）进行擦拭。擦拭后，应将粉末清除干净。镜片是否擦净，可用镜片上的反射光线进行观察检查。要注意的是，擦拭前一定要将灰尘除净。否则，灰尘中的砂粒会将镜面划起沟纹。不准用毛巾、手帕、衣服等去擦拭镜片。酒精乙醚混合液不可用的太多，以免液体进入镜片的粘接部使镜片脱胶。镜片表面有一层紫蓝色的透光膜，不要误作污物将其擦去。
 

　　３、机械部分的擦拭
 

　　表面涂漆部分，可用布擦拭。但不能使用酒精、乙醚等有机溶剂擦，以免脱漆。没有涂漆的部分若有锈，可用布蘸汽油擦去。擦净后重新上好防护油脂即可。
 

　　■机械装置故障的排除
1、粗调部分故障的排除
 

　　粗调的主要故障是自动下滑或升降时松紧不一。所谓自动下滑是指镜筒、镜臂或载物台静止在某一位置时，不经调节，在它本身重量的作用下，自动地慢慢落下来的现象。其原因是镜筒、镜臂、载物台本身的重力大于静摩擦力引起的。解决的办法是增大静摩擦力，使之大于镜筒或镜臂本身的重力。
 

　　对于斜筒及大部分双目显微镜的粗调机构来说，当镜臂自动下滑时，可用两手分别握往粗调手轮内侧的止滑轮，双手均按顺时针方向用力拧紧，即可制止下滑。如不凑效，则应找专业人员进行修理。
 

　　镜筒自动下滑，往往给人以错觉，误认为是齿轮与齿条配合的太松引起的。于是就在齿条下加垫片。这样，镜筒的下滑虽然能暂时止住，但却使齿轮和齿条处于不正常的咬合状态。运动的结果，使得齿轮和齿条都变形。尤其是垫得不平时，齿条的变形更厉害，结果是一部分咬得紧，一部分咬得松。因此，这种方法不宜采用。
 

　　此外，由于粗调机构长久失修，润滑油干枯，升降时会产生不舒服的感觉，甚至可以听到机件的摩擦声。这时，可将机械装置拆下清洗，上油脂后重新装配。
 

　　2、微调部分故障的排除
 

　　微调部分zui常见的故障是卡死与失效。微调部分安装在仪器内部，其机械零件细小、紧凑，是显微镜中zui精细复杂的部分。微调部分的故障应由专业技术人员进行修理。没有足够的把握，不要随便乱拆。
 

　　3、物镜转换器故障的排除
 

　　物镜转换器的主要故障是定位装置失灵。一般是定位弹簧片损坏（变形、断裂、失去弹性、弹簧片的固定螺钉松动等）所致,更换新弹簧片时，暂不要把固定螺钉旋紧，应按本节“三（二）2”先作光轴校正。等合轴以后，再旋紧螺丝。若是内定位式的转换器，则应旋下转动盘*的大头螺钉，取下转动盘，才能更换定位弹簧片，光轴校正的方法与前面相同。
 

　　4、聚光器升降机构故障的排除
 

　　这部分的主要故障也是自动下滑。排除方法如下：
 

　　（１）直筒显微镜聚光器的升降机构如图10-3-2所示：1. 5.赛璐珞垫圈 2.大头螺钉 3.偏心式齿杆套 4.齿杆 6.升降手轮 7.双眼螺母
 

　　调整时,一只手用双眼螺母扳手插入手轮端面上的双眼螺母内，另一只手用螺丝刀插入另一端的大头螺钉槽口内，用力旋紧即可制止下滑。
 

　　（２）斜筒显微镜聚光器的升降机构如图10-3-3所示：
 

　　调整时，首先用螺丝刀把双眼螺母中间的驻螺2退出1～2圈，轴承垫圈3是与驻螺2压紧配合的，因此，也会跟着它一起退出，并脱离齿杆10的端面。然后，用双眼螺母扳手把双眼螺母1向调节座5旋进。同时，用另一只手转动手轮，进行试验，直到升降机构松紧合适，又能停留在任意位置上时，才停止双眼螺母的旋进。zui后，再把驻螺旋入，使轴承垫圈接触齿杆10就行了。
 

　　这样调整之所以能够排除故障，是因为调节座5的内孔是锥形的。锥形轴套4在轴向有槽口，如图10-3-4所示。当双眼螺母1向里旋进时，将锥形套向里顶，使锥形套在前进时，槽口变小，内孔收缩，将齿杆10夹得更紧，加大了齿轮转动的摩擦阻力，从而制止自动下降。
 

　　生物显微镜常见故障的排除
 

　　一、 常见故障的排除
 

　　1.镜筒的自行下滑:这是生物显微镜经常发生的故障之一。对于轴套式结构的显微镜解决的办法可分两步进行。
 

　　*步:用双手分别握住两个粗调手轮,相对用力旋紧。看能否解决问题,若还不能解决问题,则要用的双柱板手把一个粗调手轮旋下,加一片摩擦片,手轮拧紧后,如果转动很费劲,则加的摩擦片太厚了,可调换一片薄的。以手轮转动不费力,镜筒上下移动轻松,而又不自行下滑为准。摩擦片可用废照相底片和小于1毫米厚的软塑料片用打孔器冲制。
 

　　第二步:检查粗调手轮轴上的齿轮与镜筒身上的齿条啮合状态。镜筒的上下移动是由齿轮带动齿条来完成的。齿轮与齿条的*啮合状态在理论上讲是齿条的分度线与齿轮的分度圆相切。在这种状态下,齿轮转动轻松,并且对齿条的磨损zui些现在有一种错误的做法,就是在齿条后加垫片,使齿条紧紧地压住齿轮来阻止镜筒的下滑。这时齿条的分度线与齿轮的分度圆相交,齿轮和齿条的齿尖都紧紧地顶住对方的齿根。当齿轮转动时,相互间会产生严重的磨削。由于齿条是铜质材料的,齿轮是钢质材料的。所以相互间的磨削,会把齿条上的牙齿磨损坏,齿轮和齿条上会产生许多铜屑。zui后齿条会严重磨损而无法使用。因此千万不能用垫高齿条来阻止镜筒下滑。解决镜筒自行下滑的问题,只能用加大粗调手轮和偏心轴套间的摩擦力来实现。但有一种情况例外,那就是齿条的分度线与齿轮的分度圆相离。这时转动粗调手轮时,同样会产生空转打滑的现象,影响镜筒的上下移动。如果这通过调整粗调手轮的偏心轴套,无法调整齿轮与齿条的啮合距离。则只能在齿条后加垫适当的薄片来解决。加垫片调整好齿轮与齿条啮合距离的标准是:转动粗调手轮不费劲,但也不空转。
 

　　调整好距离后,在齿轮与齿条间加一些中性润滑脂。让镜筒上下移动几下即可以了。zui后还须把偏心轴套上的两只压紧螺丝旋紧。不然的话,转动粗调手轮时,偏心轴套可能会跟着转动,而把齿条卡死,使镜简无法上下移动。这时如果转动粗调手轮力量过大的话,可能会损坏齿条和偏心轴套。在旋紧压紧螺丝后,如果发现偏心轴套还是跟着转的话。这是由于压紧螺丝的螺丝孔螺纹没有改好所造成的。因为厂家改螺纹是用机器改丝的,往往会有一到二牙螺纹没改到位。这时即使压紧螺丝也旋不到位,偏心轴套也就压不紧了。发现这种故障,只要用Ｍ３的丝攻把螺丝孔的螺纹攻穿就能解决问题。我用此方法*解决了我校30台生物显微镜偏心轴套跟转的问题。
 

　　把以上这些步骤都一一做好后,镜筒自行下滑问题基本上是*解决了。
 

　　2.遮光器定位失灵:这可能是遮光器固定螺丝太松,定位弹珠逃出定位孔造成。只要把弹珠放回定位孔内,旋紧固定螺丝就行了。如果旋紧后,遮光器转动困难,则需在遮光板与载物台间加一个垫圈。垫圈的厚薄以螺丝旋紧后,遮光器转动轻松,定位弹珠不外逃,遮光器定位正确为佳。
 

　　3、物镜转换器转动困难或定位失灵:转换器转动困难可能是固定螺丝太紧。使转动困难,并会损坏零件。太松,里面的轴承弹珠就会脱离轨道,挤在一起,同样使转动困难；另外弹珠很可能跑到外面来,弹珠的直径仅有一毫米,很容易遗失。固定螺丝的松紧程度以转换器在转动时轻松自如,垂直方向没有松动的间隙为准。调整好固定螺丝后,应随即把锁定螺丝锁紧。不然的话,转换器转动后,又会发生问题。
 

　　转换器定位失灵有时可能是定位簧片断裂或弹性变形而造成。一般只要更换簧片就行了。
 

　　4.目镜、物镜的镜片被污染或霉变:大部分显微镜使用一段时间后都会产生镜片的外面被沾污或发生霉变。尤其是高倍物镜40X　,在做《观察植物细胞的质壁分离与复原》实验时,极容易被糖液污染。如镜头被污染不及时清洗干净就会发生霉变。处理的办法是先用干净柔软的绸布蘸温水清洗掉糖液等污染物,后用干绸布擦干,再用长纤维脱脂棉蘸些镜头清洗液清洗,zui后用吹风球吹干。要注意的是清洗液千万不能渗入到物镜镜片内部。因为为了达到所需要的放大倍数,高倍物镜的镜片,需要紧紧地胶接在一起。胶是透明的,且非常暴一旦这层胶被酒精、乙醚等溶剂溶解后,光线通过这两片镜片时,光路就会发生变化。观察效果会受到很大影响。所以在清洗时不要让酒精、乙醚等溶剂渗入到物镜镜片的内部。
 

　　5.镜架、镜臀倾斜时固定不住:这是镜架和底座的连接螺丝松动所致。可用的双头板手或用尖咀钳卡住双眼螺母的两个孔眼用力旋紧即可。如旋紧后不解决问题,则需在螺母里加垫适当的垫片来解决。
 

　　
 

　　若是目镜、物镜镜头内部的镜片被污染或霉变,就必须拆开清洗。目镜可直接拧开拆下后进行清洗。但物镜的结构较复杂,镜片的叠放,各镜片间的距离都有非常严格的要求,精度也很高。生产厂家在装配时是经过校正而定位的。所以拆开清洗干净后,必须严格按原样装配好。
 

　　生物显微镜的镜片都是用精密加工过的光学玻璃片制成的,为了增加透光率,都需在光学玻璃片的两面涂上一层很薄的透光膜。这样透光率就可以达到97％— 98％。这一层透光膜表面很平整光滑,且很暴一旦透光膜表面被擦伤留有痕迹,它的透光率就会受到很大影响。观察时会变得模糊不清。所以在擦拭镜片时,一定要用干净柔软的绸布或干净毛笔轻轻擦拭,若用擦镜纸擦拭则更要轻轻擦拭,以免损伤透光膜。

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【使用方法】

　　■低倍镜的使用方法
 

　　（1）取镜和放置：显微镜平时存放在柜或箱中，用时从柜中取出，右手紧握镜臂，左一手托住镜座,将显微镜放在自己左肩前方的实验台上，镜座后端距桌边7厘米为宜，便于坐着操作。
 

　　（2）对光：用拇指和中指移动旋转器（切忌手持物镜移动），使低倍镜对准镜台的通光孔（当转动听到碰叩声时，说明物镜光轴已对准镜筒中心）。打开光圈，上升集光器，并将反光镜转向光源，以左眼在目镜上观察（右眼睁开）,同时调节反光镜方向，直到视野内的光线均匀明亮为止。
 

　　（3）放置玻片标本：取一玻片标本放在镜台上，一定使有盖玻片的一面朝上，切不可放反，用推片器弹簧夹夹住，然后旋转推片器螺旋，将所要观察的部位调到通光孔的正中。
 

　　（4）调节焦距：以左手按逆时针方向转动粗调节器，使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处，应注意在上升镜台时，切勿在目镜上观察。一定要从右侧看着镜台上升，以免上升过多，造成镜头或标本片的损坏。然后，两眼同时睁开，用左眼在目镜上观察，左手顺时针方向缓慢转动粗调节器，使镜台缓慢下降，直到视野中出现清晰的物象为止。
 

　　如果物象不在视野中心，可调节推片器将其调到中心（注意移动玻片的方向与视野物象移动的方向是相反的）。如果视野内的亮度不合适，可通过升降集光器的位置或开闭光圈的大小来调节，如果在调节焦距时，镜台下降已超过工作距离（>5.40mm）而未见到物象，说明此次操作失败，则应重新操作，切不可心急而盲目地上升镜台。
 

　　■高倍镜的使用方法
 

　　（1）选好目标：一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心，同时把物象调节到zui清晰的程度，才能进行高倍镜的观察。
 

　　（2）转动转换器，调换上高倍镜头，转换高倍镜时转动速度要慢，并从侧面进行观察（防止高倍镜头碰撞玻片），如高倍镜头碰到玻片，说明低倍镜的焦距没有调好，应重新操作。
 

　　（3）调节焦距：转换好高倍镜后，用左眼在目镜上观察，此时一般能见到一个不太清楚的物象，可将细调节器的螺旋逆时针移动约0.5－1圈，即可获得清晰的物象（切勿用粗调节器!）
 

　　如果视野的亮度不合适，可用集光器和光圈加以调节，如果需要更换玻片标本时，必须顺时针（切勿转错方向）转动粗调节器使镜台下降，方可取下玻片标本。
 

　　想让像变大就要使物镜靠近物体,目镜远离物镜一些，像变小则反之……

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【注意事项】

　　■持镜时必须是右手握臂、左手托座的姿势，不可单手提取，以免零件脱落或碰撞到其它地方。
 

　　■轻拿轻放，不可把显微镜放置在实验台的边缘，应放在距边缘10cm处，以免碰翻落地。
 

　　■保持显微镜的清洁，光学和照明部分只能用擦镜纸擦拭，切忌口吹手抹或用布擦，机械部分用布擦拭。
 

　　■水滴、酒精或其它药品切勿*头和镜台，如果沾污应立即用擦镜纸擦净。
 

　　■放置玻片标本时要对准通光孔*，且不能反放玻片，防止压坏玻片或碰坏物镜。
 

　　■要养成两眼同时睁开观察的习惯，以左眼观察视野，右眼用以绘图。
 

　　■不要随意取下目镜，以防止尘土落入物镜，也不要任意拆卸各种零件，以防损坏。
 

　　■使用完毕后，必须复原才能放回镜箱内，其步骤是：取下标本片，转动旋转器使镜头离开通光孔，下降镜台，平放反光镜，下降集光器（但不要接触反光镜）、关闭光圈，推片器回位，盖上绸布和外罩，放回实验台柜内。zui后填写使用登记表。（注：反光镜通常应垂直放，但有时因集光器没提至应有高度，镜台下降时会碰坏光圈，所以这里改为平放）

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【仪器分类】

　　显微镜分光学显微镜和电子显微镜。
 

■光学显微镜

　　它是在1590年由荷兰的杨森父子所*。现在的光学显微镜可把物体放大1500倍，分辨的zui小极限达0.2微米。光学显微镜的种类很多，除一般的外，主要有暗视野显微镜一种具有暗视野聚光镜，从而使照明的光束不从*部分射入，而从四周射向标本的显微镜.荧光显微镜以紫外线为光源，使被照射的物体发出荧光的显微镜。
 

■电子显微镜

　　电子显微镜的分辨能力以它所能分辨的相邻两点的zui小间距来表示。20世纪70年代，透射式电子显微镜的分辨率约为0.3纳米（人眼的分辨本领约为0.1毫米）。现在电子显微镜zui大放大倍率超过300万倍，而光学显微镜的zui大放大倍率约为2000倍，所以通过电子显微镜就能直接观察到某些重金属的原子和晶体中排列整齐的原子点阵。
 

　　1931年，德国的M.诺尔和E.鲁斯卡，用冷阴极放电电子源和三个电子透镜改装了一台高压示波器，并获得了放大十几倍的图象，发明的是透射电镜，证实了电子显微镜放大成像的可能性。1932年，经过鲁斯卡的改进，电子显微镜的分辨能力达到了50纳米，约为当时光学显微镜分辨本领的十倍，突破了光学显微镜分辨极限，于是电子显微镜开始受到人们的重视。
 

　　到了二十世纪40年代，美国的希尔用消像散器补偿电子透镜的旋转不对称性，使电子显微镜的分辨本领有了新的突破，逐步达到了现代水平。在中国，1958年研制成功透射式电子显微镜，其分辨本领为3纳米，1979年又制成分辨本领为0.3纳米的大型电子显微镜。
 

　　电子显微镜的分辨本领虽已远胜于光学显微镜，但电子显微镜因需在真空条件下工作，所以很难观察活的生物，而且电子束的照射也会使生物样品受到辐照损伤。其他的问题，如电子枪亮度和电子透镜质量的提高等问题也有待继续研究。
 

■扫描隧道显微镜

　　扫描隧道显微镜亦称为“扫描穿隧式显微镜”、“隧道扫描显微镜”，是一种利用量子理论中的隧道效应探测物质表面结构的仪器。它于1981年由格尔德·宾宁（G．Binning）及海因里希·罗雷尔（H．Rohrer）在IBM位于瑞士苏黎世的苏黎世实验室发明，两位因此与恩斯特·鲁斯卡分享了1986年诺贝尔物理学奖。
 

　　它作为一种扫描探针显微术工具，扫描隧道显微镜可以让科学家观察和定位单个原子，它具有比它的同类原子力显微镜更加高的分辨率。此外，扫描隧道显微镜在低温下（4K）可以利用探针操纵原子，因此它在纳米科技既是重要的测量工具又是加工工具。
 

　　STM使人类*次能够实时地观察单个原子在物质表面的排列状态和与表面电子行为有关的物化性质，在表面科学、材料科学、生命科学等领域的研究中有着重大的意义和广泛的应用前景，被科学界*为20世纪80年代世界科技成就之一。

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【仪器的历史】

　　早在公元前一世纪，人们就已发现通过球形透明物体去观察微小物体时，可以使其放大成像。后来逐渐对球形玻璃表面能使物体放大成像的规律有了认识。
 

　　1590年，荷兰和意大利的眼镜制造者已经造出类似显微镜的放大仪器。
 

　　1611年
 

　　Kepler（克卜勒）：提议复合式显微镜的制作方式。
 

　　1665年
 

　　Hooke（胡克）：「细胞」名词的由来便由虎克利用复合式显微镜观察植物的木栓组织上的微小气孔而得来的。
 

　　1674年
 

　　Leeuwenhoek（列文胡克）：发现原生动物学的报导问世，并于九年后成为*发现「细菌」存在的人。
 

　　1833年
 

　　Brown（布朗）：在显微镜下观察紫罗兰，随后发表他对细胞核的详细论述。
 

　　1838年
 

　　Schlieden and Schwann（施莱登和施旺）：皆提倡细胞学原理，其主旨即为「有核细胞是所有动植物的组织及功能之基本元素」。
 

　　1857年
 

　　Kolliker（寇利克）：发现肌肉细胞中之线粒体。
 

　　1876年
 

　　Abbe（阿比）：剖析影像在显微镜中成像时所产生的绕射作用，试图设计出的显微镜。
 

　　1879年
 

　　Flrmming（佛莱明）：发现了当动物细胞在进行有丝分裂时，其染色体的活动是清晰可见的。
 

　　1881年
 

　　Retziue（芮祖）：动物组织报告问世，此项发表在当世尚无人能*逾越。然而在20年后，却有以Cajal（卡嘉尔）为首的一群组织学家发展出显微镜染色观察法，此举为日后的显微解剖学立下了基础。
 

　　1882年
 

　　Koch（寇克）：利用苯安染料将微生物组织进行染色，由此他发现了霍乱及结核杆菌。往后20年间，其它的细菌学家，像是Klebs and Pasteur（克莱柏和帕斯特）则是藉由显微镜下检视染色药品而证实许多疾病的病因。
 

　　1886年
 

　　Zeiss（蔡氏）：打破一般可见光理论上的极限，他的发明--阿比式及其它一系列的镜头为显微学者另辟一新的解像天地。
 

　　1898年
 

　　Golgi（高尔基）：*发现细菌中高尔基体的显微学家。他将细胞用*染色而成就了人类细胞研究上的一大步。
 

　　1924年
 

　　Lacassagne（兰卡辛）：与其实验工作伙伴共同发展出放射线照相法，这项发明便是利用放射性钋元素来探查生物标本。
 

　　1930年
 

　　Lebedeff（莱比戴卫）：设计并搭配*架干涉显微镜。另外由Zernicke（卓尼柯）在1932年发明出相位差显微镜，两人将传统光学显微镜延伸发展出来的相位差观察使生物学家得以观察染色活细胞上的种种细节。
 

　　1941年
 

　　Coons（昆氏）：将抗体加上萤光染剂用以侦测细胞抗原。
 

　　1952年
 

　　Nomarski（诺马斯基）：发明干涉相位差光学系统。此项发明不仅享有权并以本人命名之。
 

　　1981年
 

　　Allen and Inoue（艾伦及艾纽）：将光学显微原理上的影像增强对比，发展趋于境界。
 

　　1988年
 

　　Confocal（共轭焦）扫瞄显微镜在市场上被广为使用。

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【几种特殊显微镜简介】

　　■暗视野显微镜　
　暗视野显微镜由于不将透明光射入直接观察系统，无物体时，视野暗黑，不可能观察到任何物体，当有物体时，以物体衍射回的光与散射光等在暗的背景中明亮可见。在暗视野观察物体，照明光大部分被折回，由于物体（标本）所在的位置结构，厚度不同，光的散射性，折光等都有很大的变化。
 

　　
　相位差显微镜的结构：
 

　　■相位差显微镜
 

　　相位差显微镜，是应用相位差法的显微镜。因此，比通常的显微镜要增加下列附件：
 

　　（1） 装有相位板（相位环形板）的物镜，相位差物镜。
 

　　（2） 附有相位环（环形缝板）的聚光镜，相位差聚光镜。
 

　　（3） 单色滤光镜-（绿）。
 

　　各种元件的性能说明
 

　　（1） 相位板使直接光的相位移动 90°，并且吸收减弱光的强度，在物镜后焦平面的适当位置装置相位板，相位板必须确保亮度，为使衍射光的影响少一些，相位板做成环形状。
 

　　（2） 相位环（环状光圈）是根据每种物镜的倍率，而有大小不同，可用转盘器更换。
 

　　（3） 单色滤光镜系用中心波长546nm（毫微米）的绿色滤光镜。通常是用单色滤光镜入观察。相位板用特定的波长，移动90°看直接光的相位。当需要特定波长时，必须选择适当的滤光镜，滤光镜插入后对比度就提高。此外，相位环形缝的中心，必须调整到正确方位后方能操作，对中望远镜就是起这个作用部件。
 

　　■视频显微镜
　将传统的显微镜与摄象系统，显示器或者电脑相结合，达到对被测物体的放大观察的目的。
 

　　zui早的雏形应该是相机型显微镜，将显微镜下得到的图像通过小孔成象的原理，投影到感光照片上，从而得到图片。或者直接将照相机与显微镜对接，拍摄图片。随着CCD摄像机的兴起，显微镜可以通过其将实时图像转移到电视机或者监视器上，直接观察，同时也可以通过相机拍摄。80年代中期，随着数码产业以及电脑业的发展，显微镜的功能也通过它们得到提升，使其向着更简便更容易操作的方面发展。到了90年代末，半导体行业的发展，晶圆要求显微镜可以带来更加配合的功能，硬件与软件的结合，智能化，人性化，使显微镜在工业上有了更大的发展。
 

　　■荧光显微镜
　在萤光显微镜上，必须在标本的照明光中，选择出特定波长的激发光，以产生萤光，然后必须在激发光和萤光混合的光线中，单把萤光分离出来以供观察。因此，在选择特定波长中，滤光镜系统，成为极其重要的角色。
 

　　萤光显微镜原理：
 

　　（A） 光源：光源幅射出各种波长的光（以紫外至红外）。
 

　　（B） 激励滤光源：透过能使标本产生萤光的特定波长的光，同时阻挡对激发萤光无用的光。
 

　　（C） 萤光标本：一般用萤光色素染色。
 

　　（D） 阻挡滤光镜：阻挡掉没有被标本吸收的激发光有选择地透射萤光，在萤光中也有部分波长被选择透过。
 

　　■偏光显微镜
偏光显微镜是用于研究所谓透明与不透明各向异性材料的一种显微镜。凡具有双折射的物质，在偏光显微镜下就能分辨的清楚，当然这些物质也可用染色法来进行观察，但有些则不可能，而必须利用偏光显微镜。
 

　　（1）偏光显微镜的特点
 

　　将普通光改变为偏振光进行镜检的方法，以鉴别某一物质是单折射（各向同行）或双折射性（各向异性）。双折射性是晶体的基本特性。因此，偏光显微镜被广泛地应用在矿物、化学等领域，在生物学和植物学也有应用。
 

　　（2）偏光显微镜的基本原理
 

　　偏光显微镜的原理比较复杂，在此不作过多介绍,偏光显微镜必须具备以下附件：起偏镜，检偏镜，补偿器或相位片，无应力物镜，旋转载物台。
 

　　■超声波显微镜
　超声波扫描显微镜的特点在于能够的反映出声波和微小样品的弹性介质之间的相互作用，并对从样品内部反馈回来的信号进行分析！图像上（C-Scan）的每一个象素对应着从样品内某一特定深度的一个二维空间坐标点上的信号反馈，具有良好聚焦功能的Z.A传感器同时能够发射和接收声波信号。一副完整的图像就是这样逐点逐行对样品扫描而成的。反射回来的超声波被附加了一个正的或负的振幅，这样就可以用信号传输的时间反映样品的深度。用户屏幕上的数字波形展示出接收到的反馈信息（A-Scan）。设置相应的门电路，用这种定量的时间差测量（反馈时间显示），就可以选择您所要观察的样品深度。
 

　　■解剖显微镜
　解剖显微镜，又被称为实体显微镜或立体显微镜，是为了不同的工作需求所设计的显微镜。利用解剖显微镜观察时，进入两眼的光各来自一个独立的路径，这两个路径只夹一个小小的角度，因此在观察时，样品可以呈现立体的样貌。解剖显微镜的光路设计有两种： The Greenough Concept和The escope Concept。解剖显微镜常常用在一些固体样本的表面观察，或是解剖、钟表制作和小电路板检查等工作上。
 

　　■医学和生物学常使用的光学显微镜
有下列12种：
 

　　暗视野显微镜 在普通光学显微镜台下配一个暗视野聚光器（图4）,来自下面光源的光线被抛物面聚光器反射，形成了横过显微镜视野而不进入物镜的强烈光束。因此视野是暗的，视野中直径大于 0.3m的微粒将光线散射，其大小和形态可清楚看到。甚至可看到普通明视野显微镜中看不见的几个毫微米的微粒。因此在某些细菌、细胞等活体检查中常常使用。
 

　　■场发射扫描电子显微镜
　主要用途： 该仪器具有超高分辨率，能做各种固态样品表面形貌的二次电子象、反射电子象观察及图像处理。 具有高性能x射线能谱仪，能同时进行样品表层的微区点线面元素的定性、半定量及定量分析，具有形貌、化学组分综合分析能力。
 

　　仪器类别： 03040702 /仪器仪表 /光学仪器 /电子光学及离子光学仪器
 

　　指标信息： 二次电子象分辨率：1.5nm 加速电压：0～30kV 放大倍数：10-50万倍连续可调工作距离：5～35mm连续可调倾斜：-5°～45° x射线能谱仪： 分辨率：133eV 分析范围：B-U
 

　　附件信息： 镀金镀炭仪 ISIS图像处理系统背散射探头
 

　　场发射扫描电镜，由于分辨率高，为纳米材料的研究提供了可靠的实验手段。另外，对半导体材料和绝缘体，都能得到满意的图像，对超导薄膜，磁性材料，分子束外延生长的薄膜材料，半导体材料进行了形貌观察，并对多种材料进行了微区成份分析，均能得到满意的结果
 

　　金相显微镜参数:
 

　　规格： 1、目镜管
 

　　三目镜管：倾角30°，眼瞳调节范围 55mm-75mm
 

　　2、目镜：目镜：10（￠18mm）
 

　　3、五孔物镜转换器（一般四孔）：
 

　　PL4X、PL10X、PL20X、PL40X、PL100X（可选购PL60X）
 

　　4、载物台
 

　　方台：150*200mm
 

　　移动范围：15*15mm
 

　　5、照明
 

　　柯勒照明、6V20W卤素灯、亮度可调
 

　　产品说明：
 

　　1、显微镜主体　1台
 

　　2、三目镜筒　1只
 

　　3、物镜：PL4X、PL10X、PL20X、
 

　　PL40X、PL100X　各1只
 

　　4、目镜：10X /18mm　1对
 

　　5、载物台压簧　1只
 

　　6、滤色片　2片
 

　　7、载物片：φ10、φ20　各1块
 

　　8、溴钨灯泡6V20W　2只
 

　　9、香柏油　1瓶
 

　　10、随机文件　1套
 

　　可选购配件：
 

　　目镜：12.5X目镜、10X平场分划目镜（ 格值0.1mm）
 

　　物镜测微尺、80X物镜、50X物镜
 

　　采集卡、适配镜、图像分析软件、打印机、数码相机、摄像头
 

　　图像资料：
 

　　备注： MC006-5XB-PC金相显微镜主要用于鉴定和分析金属内部结构组织，它是金属学研究金相的重要仪器，是工业部门鉴定产品质量的关键设备，该仪器配用摄像装置，可摄取金相图谱，并对图谱进行测量分析，对图象进行编辑、输出、存储、管理等功能。

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【生物显微镜（技术参数）】

　　规格： 图象适配镜：0.44倍
 

　　消色差物镜：4X 10X 40X 100X（油）
 

　　广角目镜：　10X 16X
 

　　聚光镜：　1.25NA
 

　　调焦范围：　25mm 微动格值：0.002mm
 

　　机械平台：　160×140mm
 

　　移动范围：　横向 70mm 纵向 50mm
 

　　光瞳间距：　55-75mm
 

　　卤钨灯泡：　6v/15w
 

　　电源：　220V 50Hz
 

　　产品说明：
 

　　1、主机　1台
 

　　2、三目镜筒　1只
 

　　3、消色差物镜：4X、10X、40X、100X（油） 各1只
 

　　4、目镜：10X、16X　各1对
 

　　5、滤色片（兰、黄、绿）　各1片
 

　　6、油镜油　1瓶
 

　　7、备用灯泡6V20W　1只
 

　　8、随机文件　1套
 

　　可选购：
 

　　图象适配镜
 

　　CCD：松下240， 480线　
 

　　数码相机：索尼W5 500万像素
 

　　索尼W7 700万像素　
 

　　图集卡　CG400　
 

　　图像资料:
 

　　用途：用于生物学、细菌学、组织学、药物化学等研究工作以及临床度验之用。具有粗微动同轴的调焦机构，滚珠内定位转换器，亮度可调的照明装置，并带有摄影、摄像接口。

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【透反射式偏光显微镜】

　　透反射式偏光显微镜，随着光学技术的不断进步，作为光学仪器的偏光显微镜，其应用范围也越来越广阔，许多行业，如化工的化学纤维，半导体工业以及药品检验等等，也广泛地使用偏光显微镜。XPV-213透射偏光显微镜就是非常适用的产品，可供广大用户作单偏光观察，正交偏光观察，锥光观察以及显微摄影，配置有石膏λ、云母λ/4试片、石英楔子和移动尺等附件，是一组具有较完备功能和良好品质的新型产品.本仪器的具有可扩展性，可以接计算机和数码相机。对图片进行保存、编辑和打印。
 

　　【操作练习】
 

　　一）低倍镜、高倍镜的使用练习
 

　　1. 观察文字或字母装片：取一片字母装片，用低倍镜观察，反复练习对光、调光、标本放置和调节焦距等。如将玻片前后左右移动时，注意物像与玻片移动方向是否一致，玻片上的字母是正像还是反像，为什么?
 

　　2. 观察羊毛片（或头发）交叉装片：取一张毛（发）交叉装片，先用低倍镜观察，找到两根毛（发）后，再将毛（发）交叉点移到视野*，然后换高倍镜观察，再轻微转动细调节器，观察不同层次，判定哪条毛（发）在上方，哪条位于下方。
 

　　（二）油镜的使用练习
 

　　1. 取一张血涂片或取血一小滴，滴于清洁的载玻片一端，另取一张边缘平整的载玻片，按照图1-3所示做成血涂片。先用低倍镜再用高倍镜进行观察。
 

　　图1-4 蛙血涂片 图 1-5 运动神经细胞
 

　　2. 用油镜观察，并分辨红细胞、白细胞和淋巴细胞，比较三种物镜的放大倍数和分辨率。
 

　　3. 观察兔脊神经节切片（示固定染色的细胞）
 

　　取兔脊神经节切片标本先在调好光线的低倍镜下观察（固定染色的标本需调较亮光线），低倍镜下找到要观察的标本，为淡紫色的神经节切面，在其外围包有被膜，且向内伸入，形成神经节的结缔组织支架，节内有许多大小不等的神经细胞，呈散在分布。然后转换高倍镜，选择完整而清晰的圆形
 

　　图 1-6感觉神经细胞
 

　　神经细胞仔细观察其内部结构。可见到在细胞*有一圆形核，核内有着色为深紫红色的圆形核仁及染色质颗粒，核与细胞膜之间是均匀浅紫色的细胞质，在细胞的外面围有若干个被囊细胞，它起保护神经细胞的作用。在神经细胞之间还可看到有轴索横断面和许多神经纤维，多呈交错排列。
 

　　s
 

　　图1-3血涂片的制备方法
 

　　4. 观察完毕，务必将油镜按正确方法擦净。
 

　　【其它几种显微镜简介】
 

　　目前在生物学和医学研究中，常用的显微镜，还有以下几种：
 

　　1. 双筒解剖显微镜：解剖较小标本或观察玻片标本的全貌时，需使用解剖显微镜，以观察自然状态下较小的实体（正像）和较大的玻片标本，或解剖细小生物。
 

　　2. 暗视野显微镜：是一种具有暗视集中器或*遮光板的显微镜。即在聚光镜上加一特殊装置，使光线从集光器透镜的边缘衍射或反射到标本上，经标本反射投入物镜内，使整个视野变暗，故能在视野中见到被检物体衍射之图像。这种显微镜可观察运动着的有机体。
 

　　3. 荧光显微镜：其特点是以紫外光为光源，利用紫外光照射，使标本内的荧光物质激发出不同颜色的荧光，以研究标本内某些物质的特征和位置。有些物质本身能发出荧光，有些物质需经荧光染料染色后才能发出荧光。
 

　　4. 相差显微镜：活细胞在普通光镜下，一般不能分辨其细微结构。这是由于各细微结构的折光性很近似或对比不够显著的缘故。相差显微镜则是在聚光器下装一个环状光栏，其物镜是安有相板的相差物镜。环状光栏的作用是造成空心的光线锥，使直射光和衍射光分离。相板的作用是使直射光和衍射光发生干涉，导致相位差变成振幅差（即明暗差），使反差加强。所以，可以观察活细胞中不同染色的微细结构。
 

　　5. 倒置显微镜：物镜位于标本的下方，而光源位于标本的上方。主要用于细胞培养时观察培养瓶中细胞的生长情况。