【影响因素】
1．标本用EDTA抗凝，其次用肝素。 
2．标本要新鲜采集，不能发生凝血。 
3．制备细胞悬液时，使用标准溶血剂以使红细胞充分溶解。 
4．血液采集后，应尽快进行免疫荧光染色和固定，zui迟不能超过6h。 
5．标记后的细胞应尽快上机检测，zui迟不能超过72h。
【临床意义】
正常机体中各T淋巴细胞亚群相互作用，维持着机体的正常免疫功能。当不同淋巴细胞亚群的数量和功能发生异常时，机体就可导致免疫紊乱并发生一系列的病理变化。目前越来越多的研究说明，T淋巴细胞亚群在各种临床疾病如自身免疫性疾病、免疫缺陷性疾病、变态反应性疾病、再生障碍性贫血、病毒感染、恶性肿瘤等都有异常改变。因此，T淋巴细胞亚群的检测对控制这些疾病的发生、发展、了解疾病的机制、指导临床治疗都有极其重要的意义，它已作为临床研究的一种重要手段。 
1.T淋巴细胞亚群与自身免疫和免疫缺陷病现已普遍认为在自身免疫病中,CD8+细胞的数量和功能的低下是发病的重要因素，有时也CD4+细胞数量和功能的增高。zui典型的例子就是活动性系统性红斑狼疮（SLE）患者，这种疾病患者外周血单个核细胞中CD8+细胞百分率下降，常伴有CD4+细胞百分率增高，CD4+/CD8+比值升高。其他自身免疫病象HBsAg阳性的乙型肝炎，多发性硬化症活动期，自身溶血性贫血，类风湿症，重症肌无力，急性GVHD或排斥反应时患者都具有类似的T淋巴细胞亚群异常分布的特征。 
CD4+/CD8+比值减小是免疫缺陷病的重要指征。在获得性免疫缺陷综合征（AIDS）患者中，就存在着CD4+细胞数显著减少的现象，因而常常出现CD4+／CD8+比值倒置。在一些上呼吸道感染的患者中，体内T抑制细胞的数量和功能都有异常增高的现象。 
2．人类T淋巴细胞亚群和病毒感染现已证明，很多感染性疾病者和免疫抑制有关，CD4+／CD8+比值的倒置被认为是病毒感染性疾病的重要指征。在水痘、猩红热、麻疹患者中就发现有CD3+、CD4+细胞数减少，CD8+细胞数增多，CD4+/CD8+比值降低。在急性期和复发的传染性单核细胞增多症中也有CD4+／CD8+比值降低的现象，它是由CD8+细胞数增高引起的。此外HBsAg阳性的乙型肝炎、疱疹感染，以及血吸虫病患者都有类似的CD4+／CD8+比值下降的报道。 
3.T细胞亚群和肿瘤发生许多研究都证实肿瘤患者外周血中T淋巴细胞亚群数值异常。其特征是患者体内CD3+细胞、CD4+细胞明显减少，而CD8+细胞明显增加，CD4+/CD8+比值显著降低。在实体瘤患者像消化道癌症、肝癌、乳腺癌等患者中都有CD3+、CD4+细胞数降低，CD8+细胞数增多，CD4+／CD8+比值明显降低的现象。在血液性肿瘤患者中T淋巴细胞亚群的异常变化就更为复杂。上述结果说明肿瘤患者的细胞免疫功能处于免疫抑制状态，患者对识别和杀伤突变细胞的能力下降，形成了肿瘤的生长、转移。通过检测肿瘤患者T淋巴细胞亚群的异常变化，了解机体的免疫动态，可指导临床上使用免疫调节剂及其他药物治疗肿瘤患者，以调节其免疫功能，增强机体的抗肿瘤能力。 
4.T淋巴细胞亚群与造血随着T淋巴细胞亚群检测技术在各方面的应用，现已发现骨髓造血细胞的增殖和分化障碍与T淋巴细胞亚群异常有关。如在再生障碍性贫血与粒细胞减少症中，患者体内外周血CD4+细胞数减少，CD8+细胞数增多，CD4+／CD8+比值明显下降。在血小板减少症患者中CD3+、CD4+细胞百分比都有明显的下降，相应地CD4+/CD8+比值显著下降。在探讨淋巴细胞亚群异常对造血的影响时，发现患者体内激活的Ts细胞能抑制体外GM-CFUC的生长。由此可推测粒细胞减少症患者体内增生的Ts细胞是发病的重要因素。骨髓重建期患者的T淋巴细胞亚群也存在着数量上的不平衡，它可能是骨髓移植后患者免疫功能低下的重要原因。骨髓异常增生综合征（MDS）患者的CD4+细胞百分比减少，CD8+细胞百分比增高，CD4+／CD8+比值下降。这可能是骨髓异常增生的继发表现，也可能是其发病的原发因素。