超微量Na+K+—ATP酶测试盒的组成和操作原理
时间：2015-08-05 阅读：564
超微量Na+K+—ATP酶测试盒的组成和操作原理
一、ATP酶存在于组织细胞及细胞器的膜上，是生物膜上的一种蛋白酶，它在物质运送、能量转换以及信息传递放免具有重要的作用，机体在缺氧及一些疾病状态下，此酶活力发生一系列改变，另外有些遗传疾病也与此酶活力有关。
二、测定原理：
ATP酶可分解ATP生成ADP及无机磷，测定无机磷的量可判断ATP酶活力的高低。
三、试剂组成和配置：
组分 | 50T/25样 | 100T/50样 | 保存 | |
试剂一 | 液体 | 13ml X 1瓶 | 13ml X 2瓶 | 4℃保存6个月 |
试剂二 | 液体 | 4ml X 1瓶 | 4ml X 2瓶 | 4℃保存6个月 |
试剂三 | 粉剂 | 粉剂X 4支 | 粉剂X 8支 | -20℃保存6个月 |
试剂三的配制：用时每支试剂三粉剂加双蒸馏水1ml，充分溶解。（用不完-20℃以下可保存一周。） | ||||
试剂四 | 液体 | 5ml X 1瓶 | 5ml X 2瓶 | 4℃保存6个月 |
试剂五 | 甲液 | 7ml X 4瓶 | 7ml X 8瓶 | 4℃保存6个月 |
乙液 | 6ml X 1瓶 | 6ml X8瓶 | 4 4℃避光保存6个月 | |
注：试剂五乙液在冬天或4℃长时间保存时可能会出现凝胶状物质，37℃溶解不了，可将其60℃左右水浴10分钟即可*溶解；甲液、乙液应防止磷污染。 | ||||
试剂六 | 液体 | 50ml X 1瓶 | 50ml X 2瓶 | 室温保存6个月 |
试剂七 | 10mmol/L 标准磷贮备液 | 5ml X 1瓶 | 5ml X 1瓶 | 4℃保存6个月 |
试剂十 | 贮备液 | 0.1ml X 3支 | 0.1ml X6 支 | 4℃保存6个月 |
稀释液 | 0.9ml X 3支 | 0.9ml X6支 | 4℃保存6个月 | |
试剂十的配制：取一支试剂十稀释液加入一支试剂十贮备液中，用不完的4℃保存。 | ||||
0.1umol/ml标准磷应用液的配制：用时将10mmol/L磷贮备液100倍稀释，即取0.1ml加双蒸水至10ml | ||||
0.02umol/ml磷标准液的配制：用时将0.1umol/ml磷标准液用双蒸水5倍稀释，即取0.1umol/ml磷标准液1ml加双蒸水4ml | ||||
基质液的配制： 按试剂一：试剂二：试剂三=260：80：80比例混合。需多少配多少，现用现配 | ||||
显色剂的配制：用时取一瓶试剂五甲液加入一瓶已预温好试剂五乙液中，充分混匀，需提前0.5小时配制，2--8℃条件下至少可保存5天，配好的显色剂的量够做13个管子（如果你的样本量很少，所需的显色剂的量较少，那么你可以按试剂五的甲液：乙液=7:6的比例自行配制显色剂，需多少配多少（按比例配制显色剂时要防止磷污染，用吸嘴）。 | ||||