甘油三酯(TG)测试盒,GPO-PAP酶法,操作步骤详解
时间:2015-07-14 阅读:2316
上海百蕊生物代理销售甘油三酯(TG)测试盒,GPO-PAP 酶法检测,现货供应,欢迎。操作步骤如下:
1、样本处理:
①、血清(浆):直接测定,如超过线性范围用生理盐水稀释后测定。
②、培养液样本:吸取培养液,2500 转/分,离心 10 分钟,取上清测定。
[注]:一般建议细胞密度在 100 万个/ml 以上。
③、组织样本:准确称取组织重量,按重量(g):体积(ml)=1:9 的比例,加入 9 倍体积的匀浆介质,冰 水浴条件下机械匀浆,2500 转/分,离心 10 分钟,取上清液待测。
[注]:1、如组织样本不存在高脂样本,匀浆介质统一用磷酸盐缓冲液(0.1mol/L pH 7.4)或生理盐水进行提取。 2、如组织样本为高脂样本或部分为高脂样本,匀浆介质统一用无水乙醇进行提取。
④、细胞样本:
A、细胞收集:将制备好的细胞悬液取出,1000 转/分,离心 10 分钟,弃上清液,留细胞沉淀;用 等渗缓冲液(推荐 0.1mol/L 、pH7~7.4 磷酸盐缓冲液)清洗 1~2 次,同样 1000 转/分,离心 10 分钟,弃上清液,留细胞沉淀;
B、细胞破碎:加入 0.2~0.3ml 的匀浆介质(推荐 0.1mol/L pH7~7.4 磷酸盐缓冲液或生理盐水) 进行匀浆,冰水浴条件下超声破碎(功率:300W,3~5 秒/次,间隔 30 秒,重复 3~5 次)或手动匀浆, 制备好的匀浆液不离心待测。也可采用裂解液裂解(推荐 TritonX-100,1~2%,裂解 30~40 分钟), 裂解好的液体不离心直接测定。
[注]:一般建议细胞密度在 100 万个/ml 以上。破碎好的液体可显微镜观察细胞是否破碎*