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Leica SP8 FALCON的使用技巧

时间:2024-12-24      阅读:99

Leica SP8 FALCON的使用技巧可以归纳为以下几个方面:

  1. 荧光寿命测量步骤

    • 预览及调节参数:点击预览,系统会显示荧光强度图、平均荧光寿命图和平均荧光寿命曲线。根据光子数直方图中的红线提示,调节激光强度以获得理想的光子数。

    • 设置条件并采图:在采集时间、采集帧数及光子数中选择设置一项。如果需要采集时间序列或三维图像,按常规共聚焦采集模式设置总时长或层切起点/终点。然后点击start进行采图。

    • 数据分析:选择寿命成分数量,点击Fit,系统即自动进行曲线拟合。寿命成分数量可从1开始,直至获得满意的拟合曲线。系统根据拟合结果显示荧光寿命图。

  2. 寿命成分拆分图像
    根据拟合出的寿命成分,可以对图像进行拆分,得到不同寿命的图像。这特别适合于拆分光谱接近的不同染料或者染料和自发荧光。

  3. 三维荧光寿命图像的采集和显示
    对于厚样品,FALCON可以直接采集和显示三维的荧光寿命图像,甚至可以通过LAS X的3D重建模块制作成视频。

  4. 开机顺序与操作界面

    • 开机时,注意FSU和CSU硬件的电源控制,先启动电脑,再打开显微镜控制的开关,然后依次打开其他设备。

    • 进入操作界面后,可以选择不同的功能界面进行参数设定、扫描取图、图像处理和定量测量等操作。

  5. 荧光寿命测量的原理

    • 使用光脉冲照射样本,测量发射光子到达的时间。这种测量需要在同一样本位置重复几次,测量几百个事件以达到大约10%的准确度。然后将数据按时间分组放入直方图中进行重建。

请注意,以上技巧是基于Leica SP8 FALCON的一般操作方法和原理,具体操作可能因设备配置和使用环境的不同而有所差异。在使用时,建议参考设备的操作手册或联系专业技术人员进行指导。


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