本研究通过使用商业化模块化方法（即 ML Eazy）以及一次性盒式装置的自动化系统，实现了符合质量控制标准和质量保证要求的¹⁷⁷Lu-FAPI 放射性药物的全自动合成。

¹⁷⁷Lu-FAPI-04 &¹⁷⁷Lu-FAPI-46 初步研究

为了确定合成¹⁷⁷Lu-FAPI衍生物的最佳条件，开展了一系列人工放射性标记实验。所有实验的pH 值为 4.5，由抗坏血酸缓冲体系配制而成（冻干试剂盒中含 50 毫克抗坏血酸和 7.9 毫克NaOH，溶解于 1 毫升超纯水中）。这是前期经验获得的¹⁷⁷Lu与 DOTA 螯合剂络合反应的最适宜条件。反应温度保持在 95°C 恒定不变。

通过改变肽的用量和反应时间参数，尝试优化放射化学产率和放射化学纯度。

经过研究，确定了 FAPI-04（表 1，第 4、5 项）和 FAPI-46（表 2，第 4、5 项）的最佳合成参数为：肽的用量为1mCi /μg，反应时间为 95°C 下 20 分钟。

自动化合成装置及合成方法

将确定的¹⁷⁷Lu-FAPI衍生物的最佳合成参数直接被输入到ML-Eazy合成设备中（表1和2，第4、5项）。此外，还使用了Eckert & Ziegler为常规¹⁷⁷Lu标记肽的合成预先设计的可重复使用的盒式套装。

1.将冻干的抗坏血酸缓冲液（50 毫克抗坏血酸 + 7.9 毫克NaOH）溶解在 1.0 毫升无菌超纯水中（pH 值为 4.5）。

2.加入 100 ug/uL的FAPI- 04 或 FAPI-46 后，将其转移至盒式装置中的小瓶（图 3 b）中。

3.向盐水小瓶中加入 20 毫升生理盐水，并将其连接到盒式装置中的相应位置（图 3 d）。

4.用 10 毫升无菌超纯水对CM 小瓶进行预处理，并将其与灭菌过滤器一起连接到最终产品输送管线上。

5.将最终产品小瓶（图 3e）连接到最终产品输送管线的末端。

6.将合成组件组装到合成装置上。

7.将 100 mCi ¹⁷⁷Lu（在 100 uL 0.04 M盐酸中）连接到组件上的相应位置（图 3a）。

8.启动合成工作站，并在合成完成后，获得了最终产物 ¹⁷⁷Lu-API-04 和 ¹⁷⁷Lu-FAPI-46，其放射化学产率分别为 88%±3 和 86%±3（表 3）。

表 4 总结了放射性标记过程后的结果。放射化学产率约为 85%至 90%，绝对放射化学纯度为99%。

¹⁷⁷Lu-FAPI-04&¹⁷⁷Lu-FAPI-46 在最终制剂中的稳定性

对¹⁷⁷Lu-FAPI衍生物的稳定性进行了为期 4 天的监测，从合成结束时开始（T0），在室温 24°C 条件下进行（图 6 和图 7）。通过 R-HPLC 和 R-TLC 方法进行了放射化学纯度分析。

¹⁷⁷Lu-FAPI-04&¹⁷⁷Lu-FAPI-46 在最人血浆中的稳定性

将 1 mCi的最终产物与1 毫升人体血清混合，并在 37°C 的条件下进行孵育。对这些混合物的稳定性进行了为期 4 天的监测（见图 8）。通过R-HPLC 和 R-TLC 方法进行了放射化学纯度分析。

稳定性研究表明，¹⁷⁷Lu-FAPI-04&¹⁷⁷Lu-FAPI-46在室温下制剂中以及人血清中都具有很高的稳定性，可达 4 天。

综上，本研究成功实现了¹⁷⁷Lu-FAPI 衍生物的全自动合成。这种自动化合成提供了完整的放射性标记过程，具有高产率、高重现性以及超过 99%的放射化学纯度。所有合成步骤均在合成模板中完成，无需任何人工干预。使用一次性套盒来防止交叉污染和辐射暴露。详细的质量控制和稳定性研究得到了充分展示，所有最终产品的规格均在规定的范围和可接受标准内获得