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产品介绍:
Oroboros O2k是目前国际认可度很高的一款细胞能量代谢测量/分析产品。
O2k系统通过高分辨率的极谱氧电极和全功能的荧光技术实现对样本的线粒体呼吸功能以及生物体的能量代谢进行精准定量及分析。
O2k其应用范围几乎涉及所有与细胞或线粒体能量代谢相关的领域。
多功能参数检测:可同时检测耗氧率、呼吸速率、呼吸控制比率、PH值、膜电位、离子浓度、自由基、ROS、ATP、Ca2+、NO。
多种样品适用:可用于直接测量线粒体、细胞、组织器官,或者细菌、植物细胞等。
Oroboros O2K技术优势
高精度电极检测方法
实验使用试剂开放,无实验耗材消耗
封闭性检测环境,可进行低氧/常氧/高氧实验
拥有加热/制冷模块,可实现电子控温,温度精度高
精准定量检测方式,直接检测样本消耗O2的含量
具有搅拌系统的检测腔,确保腔室内样本溶液均匀,可提高检测样本的准确性和实验重复性
性能特点:
双通道系统
测量样本容量1.5ml-3.5ml
温度范围:4-47℃,可进行低温试验
具有可变速的磁力搅拌功能
极谱氧电极传感器,检测氧流量分辨率为1 pmol O2∙s-1∙ml-1
荧光检测单元:双通道/四通道。
荧光检测参数包括:线粒体膜电位、H2O2、ATP、Ca2+、ROS、自由基。
样品腔为杜兰玻璃、钛金属等极低活性的材质,降低背景氧干扰。
同步显示流动氧的浓度;自动进行氧信号的校正。
双通道,具有注射和回抽的功能,自动化控制,可在软件的编程下进行定时、定量的精准加样,不限制加样次数。
专用组织匀浆工具,采用匀浆管技术对样本进行研磨,样本需求量少至几毫克。
可自由设计实验,根据实验设计实时的加入不同的底物、抑制剂等化合物去改变线粒体的呼吸,最多可以加入20多种。
强大的DatLab软件功能:可实时显示并记录所有测量参数;可在实验过程中随时更改实验设计;可自动进行氧气等参数的校准;具有Protocol编程功能,支持客户自定义编程以便重复实验,同时厂家提供多种Protocol程序,方便客户选用。
应用案例1:
实验目的为探究不同浓度解耦联剂FCCP对细胞氧耗率OCR的影响。
细胞经氧化磷酸化抑制剂寡酶素处理后,细胞的耗氧率显著降低,使细胞呼吸达到Leak水平。
实验第30分钟开始加入0.5uM FCCP,并每间隔120秒逐量增加0.5uM.
实验数据结果显示,随着FCCP浓度的不断增加,细胞耗氧量呈现显著增加,并且在FCCP浓度加入剂量为5.5uM时达到值,
而再增加浓度并不会使细胞耗氧率出现显著增加,这表明FCCP的浓度为5.5uM。
应用案例2:
实验目的为了解细胞的能量代谢机制。
实验样本为不同量的人类股外侧肌组织,将样本A 3.4mgWw组织与样本B 2.8mgWw 组织分别置于双通道的细胞代谢测量分析系统中,并分别加入苹果酸、辛酰肉碱、ADP、、琥珀酸、鱼藤酮、丙二酸、粘噻唑、以及抗霉素等,观察细胞的耗氧情况。红色曲线为样本A,绿色曲线为样本B,实验数据显示不同量样本加入相同剂量的药物后耗氧率基本相同。
应用案例3:
测量细胞为小鼠骨髓癌细胞。
实验中使用TIP 2k微型滴定泵加入解耦联剂FCCP,实验设定滴定间隔120秒,循环滴定15次,每次逐量增加0.5uM,加药浓度从0.5uM-7.5uM。耗氧率随解耦联剂FCCP的不同浓度的变化而不同;O2含量逐步下降。
应用案例4:
实验为测量小鼠心肌细胞的耗氧率与H2O2之间的相互作用。实验中分别添加活性氧、琥珀酸盐、、ADP、寡霉素、FCCP以及细胞色素C,实验设置为不同实验样本中加入药物的剂量相同,但顺序不同,实验数据显示不同的药物添加顺序对细胞代谢、氧化磷酸化过程产生了不同的影响。(蓝色曲线为氧含量;红色为耗氧量变化曲线;绿色为H2O2变化曲线。)