紫外分光光度计是将成分复杂的光，分解为光谱线的科学仪器，测量范围一般包括波长范围为400~760 nm的可见光区和波长范围为200～400 nm的紫外光区，不同的光源都有其的发射光谱，因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。

紫外分光光度计的原理：

紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。物质的吸收光谱就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量。

紫外分光光度计的操作步骤：

1.预热仪器。为使测定稳定，将电源开关打开，使仪器预热20min，为了防止光电管疲劳，不要连续光照。预热紫外分光光度计时和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开，使光路切断。

2.选定波长。根据要求，转动波长调节器，使指针指示所需要的单色光波长。

3.固定灵敏度档。根据有色溶液对光的吸收情况，为使吸光度读数为0.2-0.7，选择合适的灵敏度。为此，旋动紫外分光光度计的灵敏度档，使其固定于某一档，在实验过程中不再变动。一般测量固定在“1”档。

4.调节“0”点。轻轻旋动调“0”电位器，使读数表头指针恰好位于透光度为“0”处(此时，比色皿暗箱盖是打开的，光路被切断，光电管不受光照)。

5.调节T=99%。将盛蒸馏水(或空白溶液或纯溶剂)的比色皿放入比色皿座架中的格内，有色溶液放在其它格内，把比色皿暗箱盖子轻轻盖上，转动光量调节器，使透光度T=99%，即表头指针恰好指在T=99%处。

6.测定。轻轻拉动紫外分光光度计比色皿座架拉杆，使有色溶液进入光路，此时表头指针所示为该有色溶液的吸光度A。读数后，打开比色皿暗箱盖。

7.关机。实验完毕，切断紫外分光光度计的电源，将比色皿取出洗净，并将比色皿座架及暗箱用软纸擦净。