婴幼儿食品和乳品中脂肪酸的气相色谱测定

婴幼儿食品和乳品中脂肪酸的测定（乙酰氯—甲醇甲酯化法）

测定原理：

     乙酰氯与甲醇反应得到的盐酸—甲醇使试样中的脂肪和游离脂肪酸甲酯化，用甲苯提取后，经婴幼儿食品和乳品中脂肪酸检测色谱仪分离检测，外标法定量。

本方法依据《食品安全国家标准GB 5413.27—2010婴幼儿食品和乳品中脂肪酸的测定》方法中规定。

婴幼儿食品和乳品中脂肪酸检测色谱仪仪器和设备

1、万分之一电子天平；

2、恒温热水浴槽；

3、离心机：转速≥5000 转/分钟，离心管：50mL；

4、GC-6960气相色谱仪，带FID 检测器，毛细管分流/不分流进样及尾吹系统；

5、冷冻干燥仪；

6、氮吹仪；

7.、PC2560毛细管柱（100*0.25*0.20）；

测定试剂：

1、；

2、甲苯；

3、乙酰氯；

4、乙酰氯甲醇溶液；

5、碳酸钠溶液；

6、脂肪酸甘油三酯标准品：纯度≥99 %；

测定分析步骤：

1.试样处理

      试样含水量大于5%时，冷冻干燥至含水量小于5%。

      称取试样0.5 g（精确到0.1 mg）于15 mL 干燥螺口玻璃管中，加入5.0mL甲苯。

       称取无水奶油试样0.2g（精确到0.1mg）于15mL干燥螺口玻璃管中，加入5.0mL甲苯。

2.甲酯化提取

2.1试样测定液的制备

       在试样中加入10%乙酰氯甲醇溶液6.0mL，充氮气后，旋紧螺旋盖，振荡混合后于80℃±1℃水浴中放置2h，期间每隔20min取出振摇一次，水浴后取出冷却至室温。将反应后的样液转移至50mL离心管中，分别用3.0mL碳酸钠溶液清洗玻璃管三次，合并碳酸钠溶液于50mL离心管中，混匀，5000 转/分钟离心约5min。取上清液作为试液，气相色谱仪测定。

2.2标准测定液的制备

     准确吸取脂肪酸甘油三酯标准工作液0.5mL于15mL螺口玻璃管中，加入4.5mL甲苯，其他操作步骤同2.1。

色谱参考条件：

色谱柱：PC2560100m×0.25mm，0.20um

气源：氮气（99.999%）、氢气（99.999%）、空气（99.999%）

载气流速：1.0mL/min

进样口温度：260℃

分流比：30：1

检测器温度：280℃

柱温箱温度：初始温度140℃，保持5min，以4℃/min升温至240℃，保持15min

试样溶液的测定：

      分别准确吸取1.0μL脂肪酸标准测定液及试样测定液注入色谱仪，平行测定次数不少于两次，以色谱峰峰面积定量。