外泌体纯化柱 EVSecond L 70 近期研究表明细胞外的囊泡-外泌体(exosomes)跟各种病的进程和发展有很大的相关性,包括癌症的转移等;因此外泌体做为生物标记物在药物开发应用中被广泛关注。 然而它很难在生物体液(例如血清)中被分离纯化。EVSecond 是一种与门为外泌体开发的尺寸排阻类型的固相萃取小柱. 高度纯化的外泌exosomes 可以被简单的从血清、血浆以及细胞上清液中分离出来。 *:EVSecond:Extracellular Vesicle Isolation by Size Exclusion Chromatography on Drip Column ■特点 • 不使用超速离心机,以自然滴落的方式操作,操作简单 • 更快的去除样品中的自由RNA和自由蛋白质,收集到的miRNA具有高解析和高感度 • 外泌体被PBS轻轻洗脱下来,不会破坏结构,使得可以在更广泛的应用中得到使用。 • EVSecond L70在室温条件下进行纯化操作,与EVSecond相比混合时间大幅缩短 ■参数对比 new EVSecond L70 EVSecond 长度 110 mm 75 mm 填料长度 70 mm 50 mm 保存方式 冷藏保存 冷藏保存 操作条件 室温 低温室 混合方式 室温条件 10~30分钟 低温条件 一段时间 上样量 50~1,500 μL 50~700 μL 结块处理 PBS 1,500 μL×3 次 PBS 700μL×6 次
【 操作方法 】 不需要超速离心和配置抽吸装置,全部通过自然滴落的方式进行提纯。但是配备GL-SPE EXO馏分收集架操作更方便。 注:请用anti-CD9-anti-CD63 sandwich ELISA, anti-CD9 Western blotting 等方法来确定外泌体洗脱的初次片段 【 与传统提取方法比较 】 比较了密度梯度离心法、抗体亲和法以及EVSecond三种提取方法,提取的外泌体、以及细胞内的蛋白质经LC/MS方法分析。EVSecond提取方法得到的游离蛋白质比例较低
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