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TOSOH公司的尺寸排除色谱(SEC)的两种方式(GFC 凝胶过滤色谱、GPC 凝胶渗透色谱)水相体系GFC采用硅胶基的TSK-GEL SW 和聚合物基的TSK-GEL PW两种色谱柱。
SW和SWXL色谱柱特点:
·SW型适合分离蛋白质多肽。该类柱子多次在各种文献中出现。应用很广。
·SW类型的柱子填料是刚性的球形硅胶键合亲水化合物构成的。
·SW类型柱子能满足SEC对填料要求。即低吸附,孔径分布均匀和一致。
分离不同分子量蛋白推荐的流动相和色谱柱
样品分子量 | 推荐柱 | 流动相 |
5×103 - 1×105 | TSK-GEL G2000SWXL/SW/Super SW2000 | 0.1M Na SO4在0.05-0.1M 磷酸盐溶液中pH 7.0 |
1×104 - 5×105 | TSK-GEL G3000SWXL/SW/Super SW3000 | |
2×104 - 7×106 | TSK-GEL G4000SWXL/SW |
下图显示是以确定分子量的聚乙二醇、葡聚糖和蛋白质样品做的校正曲线。
上面是用SW型色谱柱(10μ,13μ)做的校正曲线,而下面是用SWXL(5μ,8μ)和SUPER SW(4μ)型色谱柱做的校正曲线。
下图是用 TSK –gel 2000SWXL 分析四个标样
1 核糖核酸酶
2 胰岛素
3 α1
4 生长激素的谱图。流动相为40%乙腈+60%三氟醋酸(0.05%水溶液)
TSK GEL 凝胶过滤色谱柱选择指南
样品 | 柱选择标准 | 选择原则 | |||
选择 | 备选 | ||||
碳水化合物 | 多糖 | TSKgel GMPWXL | G5000PWXL 和 G3000PWXL | 大孔径、线性工作曲线 | |
小颗粒、高分辨率 | |||||
寡糖 | TSKgel G-Olige-PW | G2500PWXL | 小颗粒、高分辨率 | ||
核酸 | DNA片段 | 大型 | TSKgel G-DNA-PW | - | 大孔径、小颗粒、高分辨率 |
TSKgel G5000PWXL | |||||
中型和小型 | TSKgel G4000SWXL | - | 合适的孔径 | ||
TSKgel BioAssist G4SWXL | |||||
TSKgel Super SW3000, | |||||
or G3000 SWXL /SW | |||||
TSKgel BioAssist G3SWXL | |||||
RNA | TSKgel G4000SWXL | - | 合适的孔径 | ||
TSKgel BioAssist G4SWXL | |||||
TSKgel Super SW3000 | |||||
G3000 SWXL | |||||
TSKgel BioAssist G3SWXL | |||||
寡核苷酸 | TSKgel G2500PWXL | - | 小孔径、离子化作用 | ||
蛋白质 | 一般尺寸 小-中型蛋白质 | TSKgel Super SW3000 | G3000PWXL 或 G4000PWXL | 小颗粒 小到中型范围的孔径 | |
G3000 SWXL /SW | |||||
TSKgel BioAssist G3SWXL | |||||
TSKgel G4000SWXL | |||||
TSKgel BioAssist G4SWXL | |||||
TSKgel Super SW2000 | |||||
G2000 SWXL | |||||
TSKgel BioAssist G2SWXL | |||||
大蛋白质 | 低密度脂蛋白 | TSKgel G6000PWXL | - | 大孔径 | |
TSKgel G5000PWXL | |||||
明胶 | TSKgel GMPWXL | G5000PWXL 和 G3000PWXL | 大孔径 线性工作曲线 | ||
肽 | 大型 | TSKgel Super SW3000 | SuperSW2000或G3000PWXL | 小到中型范围的孔径,多用途 | |
G3000 SWXL | |||||
TSKgel BioAssist G3SWXL | |||||
or G2000 SWXL | |||||
TSKgelBioAssist G2SWXL | |||||
小型 | TSKgel G2500PWXL | SuperSW2000或 G2000 SWXL /SW | 线性工作曲线 高分辨率 | ||
病毒 | TSKgel G6000PWXL 或 TSKgel G5000PWXL | - | 大孔、高分辨率 | ||
合成多聚物 | TSKgel GMPWXL 或 TSKgel Alpha-M | G5000PWXL 和 G3000PWXL 或 Alpha-5000和 Alpha-3000 | 大孔径、低吸收,线性工作曲线 | ||
合成寡聚物 | 非离子和阳离子 |
| TSKgel G-Olige-PW | G2500PWXL 或 SuperAW2500 | 小孔径,高分辨率 |
TSKgel G2500PWXL 或 TSKgel Alpha-2500 | |||||
阴离子 | TSKgel G2500PWXL | G2500PWXL 或 SuperAW2500 | 小孔径,离子化作用 | ||
TSKgel Alpha-2500 |