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免疫磁珠及磁性细胞分离架
1、 可供各种纯化单克隆抗体和多克隆抗体。(1) 单抗类:抗体CD系列:CD3、CD4、CD8、CD14、CD16、CD25、CD38、CD45、CD56、CD71、CD133干细胞。抗人CD系列:CD3(R73)、CD4(OX35)、CD8(OX8)、CD45(OX22)、CD5(OX19)、B(OX12)、RT1B(OX6)、RTID(OX17)抗小鼠CD系列:CD3、CD4 其它:抗人IgG r链、抗人IgM µ链、抗人HRP、抗AP、抗O157:H7、抗H37Rv、抗人HBsAG、抗ANP (2) 多抗类兔抗小鼠IgG、兔抗大鼠IgG、兔抗的IgG、兔抗O157:H7、羊抗人IgG、羊抗兔IgG、羊抗人白蛋白
2、 可供上述抗体的标记物(1) FITC荧光标记,用于流式仪(2) HRP标记,用于酶标仪(3) 胶体金标记、用于试纸条(4) 磁性微球标记、,即免疫磁珠、用于细胞、微生物、蛋白质及核酸等物质的分离
3、 其它(1) 制造多克隆抗体(2) 制造单克隆抗体及杂交瘤细胞(3) 提纯各种抗体及大分蛋白质 4、 磁性细胞分离架大六孔:10-15ml试管及离心管6只,1.5ml或2ml Eppendorf 管8只小六孔:1.5ml或2ml Eppendorf 管8只大二孔:15ml及50ml离心管(centrifuging tube)各1只,1.5ml或2ml Eppendorf 管4只小二孔:1.5ml或2ml Eppendorf 管2只 应用举例:抗人CD45免疫磁珠在测定血中微量瘤细胞的富集作用抗人CD45抗体亦称抗人白细胞共同抗原(LCA)抗体,它对全身血源性白细胞有结合作用,但不结合非血源性的肿瘤细胞。通过抗人CD45抗体免疫磁珠阴性筛选,可把分散在血液中的非血源性肿瘤细胞与血源性细胞相鉴别。由于学规应用的FACS分析仪只对>1%的细胞群体有肯定的鉴别作用,而存在于血流中的瘤细胞在大多情况下只占∠1%。为了提高检测的敏感度和效率,有必要把收取的外周血标本中廇细胞富集,从而大大提高瘤细胞在被测细胞中的百分率(>1%)。
本实验的基本原理为:用磁珠分离的技术作为*处理,把大部分血源性细胞去除,从而使瘤细胞在待测标本中的比例提高成千上万倍(104-106)。磁珠法和FACS检测的结合,使成功率大大提高。也可和端粒酶活性检测结合。
(江苏省肿瘤医院、宁波大学医学院等已有应用)国外文献报道如美、英和德等国已将“血液中瘤细胞检验”用于临床。对前列腺癌、乳腺癌、宫颈癌、肝癌、结肠癌等的诊治显示重要临床价值。磁分离技术的细胞富集度可达10,000倍左右,该试剂有阴性分离瘤细胞的灵敏度和科技进步特异性等方面均很高,已达到进口的同类产品指标。使用新芝CD45的研究成果见,中华检验医学杂志,世界华人消化杂志,河南肿瘤学杂志等学术期刊上发表的论文。如卵巢癌患者外周血癌细胞端粒酶活性的检测,河南肿瘤学杂志2002年10月第15卷第5期