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1. 诱导时间快:传统树突状细胞诱导需要8天时间,使用本方案诱导成熟树突状细胞仅需要4天时间;2. 目的细胞百分比高:使用本方案诱导成熟树突状细胞流式结果显示,终末细胞中约含有40%的成熟树突状细胞。
货号 | 名称 | 规格 |
CT-004 | DC细胞体外快速成熟试剂盒 | 100mL/套 |
产品简介
DC细胞是目前抗原提呈能力强大的细胞,它在机体免疫流程中发挥着重要作用,但由于DC细胞在外周血中含量比较少, 如何快速大量获得成熟树突状细胞成为免疫研究的一个重要课题。三一造血研发的DC细胞体外快速成熟试剂盒仅需3天 时间便能将单个核细胞(MNC)在体外诱导成树突状细胞,且含量高达40%。
产品特点
1 诱导时间快:传统树突状细胞诱导需要8天时间,使用本试剂盒诱导出成熟树突状细胞仅需3天时间;
2 目的细胞百分比高:使用本试剂盒诱导成熟树突状细胞的流式结果显示,终末细胞中含有40%的成熟树突状细胞。
试剂盒成份
DC培养基 | 100mL/瓶 | 1瓶 |
DC-I | 150ug/支(165万IU) | 1支 |
DC-II | 2ug/支 | 2支 |
DC-III | 2ug/支 | 3支 |
DC-IV | 50万IU/支 | 4支 |
DC-V | 1mg/支 | 5支 |
操作方法
DC-I用150μL PBS溶解; DC-II用20μL PBS溶解; DC-III用10μL PBS溶解; DC-IV用50μL PBS溶解; DC-V用1mL PBS溶解。可将上述因子配制后置于-20°C冰箱保存,但建议现配现用 。
1 D0 取250M个PBMC细胞,用50ml 1640培养液重悬,铺于T-175培养瓶中,置于37℃、 5%CO2培养箱孵育2h;
2 孵育2h后,轻晃T-175培养瓶,去悬浮细胞,用20mL的1640培养液洗涤两次, 分别加入DC培养基100 mL, 4.6μL DC-I溶液(至其终浓度为500IU/mL)以及4μL DC-II溶液(至其终浓度为10ng/mL), 同时加入5%的FBS, 继续置于37℃、5%CO2培养箱培养;
3 如需加入特异性抗原,可以于D2加入相应的特异性抗原(终浓度20-80μg/mL);
4. D2 分别加入5μL DC-III溶液(至其终浓度为10ng/mL),5μL DC-IV溶液(至其终浓度为500IU/mL),以及100μL DC-V溶液(至其终浓度为1μg/mL);
5 D3 收集DC细胞于50mL离心管中用PBS离心洗涤3次,收获DC细胞。
注意: 若初始的PBMC使用量非操作说明中250M的数量,请根据实际PBMC数量对试剂盒中各试剂的量做相应调整。
产品保存
1 本产品需避光保存;
2 DC培养基, DC-I与DC-IV置于2-8°C保存; DC-II, DC-III与DC-V置于-20°C保存;
3 请于保质期内使用本产品,超过保质期,请勿使用。