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面议美国ABI StepOnePlus实时荧光定量PCR仪应用:
1、仪器应用:SNP(单核苷酸多态性)基因分型、基因表达分析、MicroRNA表达分析、染色体易位分析、基因检测、病毒载量分析;
2、软件应用:基于标准曲线的定量、相对标准曲线、基于比较Ct值的相对定量、融解曲线分析、存在/不存在(阳性/阴性)分析(包括阳性内对照)、基于或非基于实时扩增的基因分型。
荧光检测:
StepOne扩增仪中的所有样本反应孔均使用一种大功率蓝色LED照明。该LED可持续使用10年,减少了更换光源的需要。荧光发射通过电二极管上的滤光器进行检测。发射滤光器经优化可配合FAMTM/SYBR® Green I、VIC/JOETM和ROXTM荧光染料使用。
软件:
美国应用生物系统公司StepOne实时PCR扩增仪配备的软件在WindowsXP®操作系统上运行,并提供仪器控制、数据采集和数据分析等功能。软件采用用户易用的直观界面,包括下列功能:
*实验没计向导,帮助您设计和设置实验。
*移液方案和配方,用于快速设置实验。
*高级设置,适用于需要灵活性以便进行更复杂应用(如多重反应)的高级用户。
*快速启动设置,允许您扛即启动实验并于稍后反应板信息。
*实时监视扩增增长曲线,让您即时查看实验进程。
*远程实日寸监控,可从一台远程计算机监控实验进程。
*电子邮件通知,在实验已开始或结束时提醒您。
*自动基线和白动阈值功能令数据分析得以简化。
*自动单核苷酸多态性基因分型识别功能,具有直观的图表输出和量值分配特性。
*工具提示功能,当查看扩增曲线或单核苷酸多态性基因分型图谱时,易于识别样本反应孔。
*故障排除标记,帮助您诊断并解决实验中出现的问题。
*多图谱视图,可同时从四个透视图评估数据。
*简便的剪切和粘贴功能。
*方便地导出为PowerPoint®、Excel®格式或直接导出为jpeg文件。
美国ABI StepOnePlus实时荧光定量PCR仪仪器规格:
VeriFlexTM加热块:六个独立控温区
热循环系统:珀耳帜效应系统(Peltier-based System)
加热块规格:96孔加热块
支持容量:10-30µl
支持耗材:96孔(0.1ml)反应板与光学盖膜、96孔(0.1ml)反应板与光学平盖、8连管(0.1ml)与光学平盖、单管(0.1ml)与光学平盖
样本升降温速率:快速模式 ±2.2℃/s;标准模式 ±1.6℃/s
加热块高升降温速率:4.6℃/s
温度范围:4℃-100℃
温度精确度:设定值/显示温度的±0.25℃(35~95℃)(时钟启动后3min开始测量)
温度均一性:±0.50℃(时钟启动后30s),温度范围35℃~95℃
解链曲线分辨率:低至0.1℃
光学系统:LED激发光源,发射滤光器、光电二极管
安装时已校正染料:FAMTM、SYBR® Green 、VIC®、JOETM、NED、TAMRA、ROXTM染料
被动参照染料:ROXTM染料
数据采集:所有滤光器中收集中的所有反应孔数据(无论何种反应板设置)。试验结束后反应板设置可修改
定量PCR分析时间:快速 不超过40分钟;标准 不超过2小时
触摸屏:LCD/6.5″ Full VGA(640×480)/32K色
尺寸:宽度 24.6cm(9.7″)、深度 51.2cm(20.2″)、高度 42.7cm(16.8″)、重量 23.6kg(52lb.)
TaqMan®基因表达,SNP(单核苷酸多态性)基因分型和MicroRNA分析
技术参数:
1、性能指标:
动态范围:9个数量级的线性动态范围
灵敏度:可在单一报道基因TaqMan分析的30µl反应量中检测10份拷贝RNaseP模板
精密度:使用TaqMan® RNase P仪器验证反应板,StepOne扩增仪可分辩5000~10000个RNase P模板拷贝(置信度99.7%)
运行时间:快速,使用TaqMan® RNase P验证测试反应板,40循环PCR反应耗时不足40min;标准,40循环PCR反应耗时不足2h
安装规格:发货前,每台StepOne扩增仪均已经过专业校准,以确保光学和热学精确度。在不足四小时安装期间,通过RNase P仪器验证测试反应板会验证各项性能规格,以确保数据的高度精确性。
2、无需PC及可联网操作。
StepOne扩增仪可采用五种不同配置进行安装:
①本地协作配置(计算机控制)
②独立运行配置(无需计算机)
③联网配置
④本地协作配置(局域网计算机控制)
⑤扩增仪联网配合木地协作计算机配置(计算机控制)
连接至以太网能够实现远程监控及下载和上载试验文件与数据。
3、计算机规格
尽管StepOne扩增仪在无计算机的情况下也可执行操作(可从仪器触摸屏上通过快速启动功能启动实验运行),但StepOne扩增仪可能配备有膝上型电脑或立式计算机及USB记忆棒。也提供不带计算机的扩增仪。
用户自行提供的计算机必须满足以下低要求方可支持本扩增仪:
·WdindowsXP操作系统并已安装ServicePack2
·英特尔处理器,主频1GHz或更高
·小内存容量512MB
·小硬盘驱动器容量20GB
·CD-ROM光盘驱动器
·以太网接口适配器(网卡)(10BASE-T)
·低分辩率达1024×1280的显示器
4、便捷的在线查询:
为便于订购实时PCR扩增母液和塑料器皿耗材,可通过扩增仪软件中的Design Wizard(设计向导)访问实验材料清单,并直接链接到美国应用生物系统公司产品仓库(可选)。
服务与保修:
购买StepOneTM实时PCR扩增仪包括—年期的免费保修(包括零件保修和维修工时)服务。