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ProteinSimple公司的NanoPro 1000超微量蛋白分析系统为蛋白功能和信号通路研究提供了一个全新的研究方案。传统的蛋白研究方法需要成千上万的细胞,而NanoPro 1000系统每次分析仅需要25个细胞。信号转导蛋白磷酸化分析系统
并可对超微量珍贵样品的信号转导蛋白之特性直接检测,适用各种样品包括:
原代细胞信号转导蛋白磷酸化分析系统
FACS 分选细胞
穿刺抽取之肿瘤细胞
显微切片组织细胞
分离的干细胞
NanoPro系统利用的毛细管样品定位及分析技术,结合毛细管分离及化学发光检测原理进行纳米级的自动化实验,避免了人为操作误差,有效提高检测结果的精确性和重复性。过去蛋白检测仪无法检测到的信息,如细胞内控制通路的调控信息,可由此精确测得。
NanoPro技术被用来分析信号转导过程中所涉及的蛋白构象上的极细微变化。NanoPro1000为结构紧凑的台式分析系统。
从新的角度分析蛋白调控机制,NanoPro技术采用等电点电泳的方法将不同构象的蛋白分离。该方法大大推进了多个领域的研究,包括:
药物开发-筛选激酶抑制剂药物的作用靶点
生物标记物的发现和确认-观察疾病引起的蛋白构象的细微变化,研究其发病机制
肿瘤蛋白活性-研究组织和细胞中肿瘤蛋白的调控机制翻译后修饰的研究-检测蛋白构象改变引起的等电点极细微的变化
NanoPro 1000将蛋白分离与检测技术相结合:
NanoPro将毛细管等电点电泳和化学发光免疫测定这两种常用的蛋白检测技术相结合。等电点电泳可将不同构象的蛋白分离。分离后蛋白被仪器固定在毛细管壁上,接着用化学发光免疫的方法检测蛋白。这为信号转导蛋白的检测提供了新的视角。
【操作流程】
上样
每个毛细管中加400nl样本混合物,包括样本、荧光标记PI和两性电解质。
分离
毛细管两端加电压,样本中的蛋白质随着自身等电点的不同,加以分离。
固定
毛细管在紫外光照射下,其毛细管壁上的化学物质被激活,从而将分离的蛋白异构体固定在毛细管壁上。
免疫标记
用洗脱液将非特异结合的蛋白质洗脱,将固定的蛋白质进行免疫反应,加入发光催化剂诱导其化学发光,发光信号被CCD摄像机拍摄下来。
结果分析
通过专业的软件,对结果进行定量分析