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在生物样品分析领域,液液萃取是利用化合物在水/血浆(或其他生物样品基质)和有机相中溶解度的差异来分离目标化合物与干扰物质。
■ 传统液液萃取用于生物样品前处理面临的挑战
●容易发生乳化现象
导致回收率偏低,除杂效果差。
●容易发生交叉污染
混合之后开盖,容易发生交叉污染,对操作者要求较高。
●操作费时费力,处理效率低
需要加样品,内标,pH调节剂-加萃取溶剂-盖硅胶盖垫-振荡-离心-取上层溶液等操作步骤,处理效率低。
■固相支撑液液萃取—SLE
●萃取原理与传统液液萃取类似;
●填料为经过特殊工艺处理的惰性材料(改良过的硅藻土);
●高比表面积,能够提供足够的液液分配支撑表面;
●有效避免乳化现象;
●有效避免交叉污染;
●操作过程仅需上样-静置-洗脱三步,省去了振荡,离心,取上层溶液等操作,并可配套自动化装置操作,大大提高工作效率;
●产品规格多样,既有96孔板,也有小柱形式。
■通用操作方法(以400μL SLE板为例)
■适用基质:
(1) 缓冲液
对于大多数疏水性化合物和中性亲水性化合物的提取,通常用水或以0.1%甲酸稀释样品溶液的pH至6.4或8.0;
对于碱性化合物,通常用0.5M氨水缓冲液调到pH=10.4;
对于酸性化合物,通常用1 %甲酸水缓冲液调到pH=3.2。
样品和缓冲液的稀释比例建议至少1:1,根据情况可以调整稀释比例 样品:缓冲液(V/V)1:2到1:3。
(2) 上样量
200L(或260mg)规格的SLE板,上样量(包含样品,缓冲液及内标等)为200L;
400L(或400mg)规格的SLE板,上样量(包含样品,缓冲液及内标等)为400L。
(3) 洗脱用有机溶剂
需根据化合物性质选择合适的有机溶剂,常用洗脱溶剂为正己烷,乙酸乙酯,二氯甲烷,叔丁基甲醚等