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经销商厂商性质
上海市所在地
产品名称 | C32人恶性黑色素瘤细胞 | 货号 | AXB6161 |
规格 | 1×10⁶cells/T25培养瓶 | 英文名 | C32 |
分类 | 人细胞系 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
公司所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗,仅可用于工业或科研等非医疗目的。
细胞冻存注意事项:
(1) 细胞的收获
用来冻存的细胞一般选择在细胞约铺满 90% 的时候,这时细胞生长状态好,细胞数量也多,并且在收获细胞前 24 小时换一次培养液。收获用来冻存的细胞开始时方法和平时一样,用 100xg 离心 5 分钟收集细胞再重悬,活细胞记数。稀释或浓缩到细胞保存的最终细胞浓度的二倍(一般是 400-1000 万 细胞 /ml ),加入已经配好的等体积的培养液保护剂混合溶液中轻轻混匀,分装到冻存管,冷冻保存。
(2) 保护剂的使用
细胞冻存中, 一般使用DMSO 作为保护剂。在细胞冻存中, DMSO 使用的最终浓度一般是 5-15% ,某种具体细胞的冻存液中的DMSO浓度可以从ATCC查到。对特别敏感的细胞特别是杂交瘤细胞在冻存时使用 95% 血清和 5%DMSO 可能会好些。保护剂在使用时先用培养液或血清配成最终浓度的2倍,再与等体积的悬浮细胞的培养液混合。
(3) 细胞冻存的速率
细胞的冷冻速率最适控制在让细胞有足够的时间脱水而又不被过度脱水导致细胞损害。对大多数细胞来说,每分钟降 1 至 3 ℃是合适的。通常的操作是把细胞先在-20℃1-2个小时,再放入 -80℃冰箱过夜(如果没有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再转入液氮罐或低于 -130℃的冰箱长期保存。
(4) 储存环境
细胞长期保存温度是 -130 ℃或更低。液氮罐中气态层温度在 -140℃至 -180℃之间,细胞可保存在气态层或浸入液氮中,如果可能最好保存在气态层,因为这样可避免由于有液氮进入冻存管而在拿出细胞时引起爆炸(但是这样液氮罐内只能存储少量液氮,需要经常添加)。细胞也可以在-80℃冰箱保存几个月左右的时间。
公司正在出售的产品:
PCNA ELISA Kit 大鼠抗增殖细胞核抗原抗体Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-PBEF1(NT) 内脂素Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GAK protein 细胞周期蛋白G相关激酶抗体 规格 0.2ml
FASL(Human Factor-related Apoptosis ligand) ELISA Kit 人凋亡相关因子配体 96T
Nicalin 英文名称: γ-分泌酶组件蛋白NCLN抗体 0.2ml
ATG16L 英文名称: 自噬相关蛋白16A抗体 0.2ml
Anti-PBEF1(NT) 内脂素Multi-class antibodies规格: 0.2ml
ICA ELISA Kit 大鼠胰岛细胞抗体Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-TSLC1 肺癌阻抑基因1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GFP 绿色荧光蛋白(免疫组化用抗体) 规格 0.1ml
EMA IgA ELISA Kit 大鼠抗肌内膜抗体IgA 96T
NHLRC3 英文名称: 非霍奇金淋巴瘤重复蛋白3抗体 0.2ml
phospho-CDC16(Ser560) 英文名称: 0酸化细胞分裂周期蛋白16抗体 0.1ml
Anti-TSLC1 肺癌阻抑基因1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
OLAb ELISA Kit 大鼠氧化低密度脂蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-TSP-1/THBS1 酶敏感蛋白1抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh GFAP delta 胶质纤维酸性蛋白GFAPδ抗体 规格 0.2ml
LF/LTF ELISA Kit 大鼠乳铁传递蛋白/乳铁蛋白 96T
NHLRC2 英文名称: 非霍奇金淋巴瘤重复蛋白2抗体 0.2ml
ALS2CR1 英文名称: 肌侧索硬化症相关蛋白1抗体 0.2ml
Anti-TSP-1/THBS1 酶敏感蛋白1抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
ASMA ELISA Kit 大鼠抗平滑肌抗体Multi-class antibodies规格: 48T
C32人恶性黑色素瘤细胞Anti-TTF-1 甲状腺核转录因子-1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GFAP 胶质纤维酸性蛋白抗体 规格 0.1ml
AVP(Human arginine vasopressin) ELISA Kit 人精酸加压素 96T
NHLRC1 英文名称: 肌痉挛性癫痫病相关EPM2蛋白抗体 0.2ml
ADORA2B 英文名称: 腺苷A2b受体/神经生长因子1受体抗体 0.2ml
Anti-TTF-1 甲状腺核转录因子-1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
操作步骤:
(1) 细胞系培养:取6cm细胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105个细胞培养液,37℃ CO2培养密度至40%~60%,密度过大,转染后不利筛选细胞。
(2) 转染液制备:在EP管中制备以下两液(为转染每一个孔细胞所用的量)
A液:用不含血清培养基稀释1ug 质粒DNA。
B液:用不含血清培养基稀释2ul脂质体。
分别将A液与B液轻弹混匀,静置5分钟。
(3) 吸取B液加入至A液中,轻弹混匀。室温中置10-15分钟。
(4) 转染准备:用1mL不含血清培养液漂洗两次,再加入4mL不含血清培养液。
(5) 转染:把A/B复合物缓缓加入培养液中,摇匀,37℃温箱置6~24小时,吸除无血清转染液,换入正常培养液继续培养。
(6) 瞬时转染后,可在48h-72h细胞长满之后,提取细胞蛋白或者RNA,验证敲减/过表达效率。