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上海市所在地
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
产品名称 | 分类 | 货号 |
z猪胸膜肺炎防线杆菌(APP)核酸检测试剂盒 | 恒温荧光法 | FS-P10702 |
PCR技术的定量原理:
扩增曲线
在Real-time qPCR中,对整个PCR反应扩增过程进行了实时的检测并记录其荧光信号,随着反应的进行,监测到的荧光信号可以绘制成一条曲线,即为扩增曲线。荧光扩增曲线一般分为基线期、指数增长期和平台期。
在Real-time qPCR扩增早期,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,无法判断产物量的变化,此时即为基线期。
PCR反应过程中产生的DNA拷贝数是呈指数形式增加的,随着反应循环数的增加,最终PCR反应不再以指数形式生成模板,从而进入“平台期”。在该时期,扩增产物已不再呈指数级的增加,PCR的终产物量与起始模板量之间无线性关系,所以根据最终的PCR产物量不能计算出初始模板量。
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
PCR检测试剂盒:
(一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中,按100g:3ml的比例加入Trizol试剂,严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg组织,宁多勿少)置于玻璃匀浆器中匀浆后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振荡15s,室温置5min。
(5)4ºC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol,振摇,置室温10min。
(8)4ºC 12000g离心10min,EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清,纸巾吸干,加入75%乙醇1ml,振摇,充分洗涤沉淀。
(10)4ºC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇,空气干燥10min(可离心加快干燥,尽量吸尽离心液体)。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混匀),-20ºC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度,所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳,显示出清晰的28s和18s两条rRNA。
盐单胞菌潜在的有机污染物降解菌/分离自石油富集菌群模式菌株: no沉积物/TVMC沉积物/TVMC沉积物/TVMC沉积物(11-15cm)提供形式: 冻干物安全等级: 1培养基: 821生长条件: 28℃
平菇生长条件: 25培养基: 14提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no 定期移植法
-1435℃冰箱冻结;真空冷冻干燥
费希新萨托菌产生真菌素模式菌株: no土壤提供形式: 冻干物安全等级: 1培养基: CM0014生长条件: 26C
蜜环菌培养基: 综合PDA琼脂:马铃薯提取液1.0L ,葡萄糖20.0g ,KH2PO43.0g ,MgSO4·7H2O1.5g ,维生素B1微量g ,琼脂15.0g ,pH 6.0天麻提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no生长条件: 25℃,好氧 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
ivcas7.00428对小菜蛾有低,对蚜虫中等性。模式菌株: no种属: Bacillus│thuringiensis提供形式: 冻干物安全等级: 1培养基: 0002生长条件: 30℃
酿酒酵母培养基: 312酵母表面展示系统受体菌株,与pYD1质粒配套使用提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no生长条件: 30℃ -80℃冰箱冻结法
ivcas7.00691模式菌株: no安全等级: 1种属: Bacillus│thuringiensis土壤提供形式: 冻干物培养基: 0002生长条件: 30℃
解脂假丝酵母培养基: CM0077柠檬。提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no生长条件: 28℃ 真空冷冻干燥法
-1436℃冰箱冻结;真空冷冻干燥
传染性支气管炎病分析检测模式菌株: no病鸡支气管提供形式: 冻结物安全等级: 2培养基: 0生长条件: 37
猪呼吸与繁殖综合征病用于科研模式菌株: no脏器提供形式: 冻干物安全等级: 2培养基: 0生长条件: 37
猪传染性胸膜肺炎放线杆菌科研及血清定型模式菌株: no病猪肺提供形式: 冻干物安全等级: 2培养基: 814生长条件: 37
木霉属培养基: CM0014抗癌活性提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no生长条件: 28C 真空冷冻干燥
PichiaPink-1模式菌株: 未知
大肠埃希菌教学和科研模式菌株: no脏器提供形式: 冻干物安全等级: 2培养基: 335生长条件: 37
异古伦宾HEV 戊型肝炎病(抗原) 成纤维生长因子受体4IgG
乙酰蒲公英萜HGV(Hepatitis G vivus) 庚型肝炎病(抗原) 生物素标记碱性成纤维生长因子受体1 IgG
硬脂甲酯HisX6 聚组氨标签蛋白 抗纤维生长因子结合蛋白IgG
油甲酯HIV gp120 艾滋病病(抗原) 凝血酶原酶IgG
茵芋苷HSP-60( Heat shock protein-60) 热休克蛋白-60(抗原) 抗脆性组氨三联体IgG
羊藿次苷IIHSP-70 peptide 热休克蛋白-70(多肽抗原) 抗“衰老关键蛋白”IgG
标准品alpha Adaptin/AP1 衔接蛋白α抗原抗体
氧化白藜芦ICAD(Inhibitor of Caspase-Activated DNase ) Caspase 激活的脱氧核糖核酶抑制剂(抗原) 抗磷化脆性组氨三联体IgG
乙酰天麻素IDE 胰岛素降解酶(抗原) 抗“衰老关键蛋白”IgG
3-异倒捻子素IGF-1 R 人胰岛素样生长因子-I受体 丝聚蛋白/中间丝蛋白IgG
z猪胸膜肺炎防线杆菌(APP)核酸检测试剂盒TobramycinSulfate 硫妥布霉素 质量规格:>95%,BR
TobramycinSulfate 硫妥布霉素(标准品) 质量规格:>95%,BR
Tolnaftate 托萘酯 质量规格:>95%,BR
TopotecanHCl 拓扑替康盐盐 质量规格:>95%,BR
TopotecanHCl 拓扑替康盐盐(标准品) 质量规格:>95%,BR
Torasemide 托拉塞米 质量规格:>95%,BR
Travoprost 曲沃前列素 质量规格:>95%,BR
TrazodoneHCl 盐曲唑 质量规格:>95%,BR
TrazodoneHCl 盐曲唑(标准品) 质量规格:>95%,BR
Trilostane 曲洛司坦/亚硝盐环氧雄 质量规格:>95%,BR
Trilostane 曲洛司坦(标准品) 质量规格:>95%,BR
TriptorelinAcetate 醋曲普瑞林 质量规格:>95%,BR
VancomycinHCl 盐万古霉素 质量规格:>95%,BR
VancomycinHCl 盐万古霉素(标准品) 质量规格:>95%,BR
Vandetanib 凡德他尼 质量规格:>95%,BR