参数规格：
产品名称：Cry1A（b）基因核酸检测试剂盒
产品规格：48T  0.1PCR管
产品货号：FS-P10722
产品分类：荧光探针法
产品运输：低温运输
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
产品特点：
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。
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实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤 
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）    1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
实时荧光定量PCR：
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。因此，实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的：
1）Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时，刚刚进入真正的指数扩增期（对数期），此时微小误差尚未放大，因此Ct值的重现性，即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系，可利用标准曲线对未知样品进行定量测定，因此，实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量最准确，重现性*定量方法，已得到的*，广泛用于基因表达研究、转基因研究，药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。
定量PCR方法：
a、竞争法
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
b、内参照法
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或生物素等标记引物，扩增产物被固相板上特异的探针所结合，再加入抗di高辛或生物素酶标抗体－辣根过氧化物酶结合物，最终酶使底物显色。常规的PCR－ELISA法只是定性实验，若加入内标，作出标准曲线，也可实现定量检测目的。
日本慢生根瘤菌分类学研究模式菌株: no棕壤类土壤提供形式: 冻干物安全等级: 1培养基: 63生长条件: 28℃

青黄链霉菌生长条件: 28℃培养基: 0012提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法

肺炎克雷伯氏菌培养基: CM0100产2,3-丁二醇。提供形式: 冻干物安全等级: 2模式菌株: no生长条件: 30℃ 真空冷冻干燥法

 -1490℃冰箱冻结；真空冷冻干燥

 ivcas7.00079模式菌株: no安全等级: 1种属: Bacillus│thuringiensis土壤提供形式: 冻干物培养基: 0002生长条件: 30℃

阿耶波多氏芽孢杆菌培养基: 821微生物/低温菌(15℃)土壤/河边水草根际土提供形式: 冻干物模式菌株: no生长条件: 15℃ 液氮超低温冻结法；-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法

小孢矛束霉生长条件: 25℃培养基: 0014提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no

枯草芽孢杆菌培养基: 2模式菌株: no土壤提供形式: 冻干物安全等级: 1生长条件: 50℃ -80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法;其他

米曲霉（公开保藏）培养基: 综合PDA：20%马铃薯汁1L，葡萄糖20g ，KH2PO4 3g， MgSO4.7H2O 1.5g，硫胺素微量，琼脂 15g，pH 自然。发酵醋，产纤维素酶等；科研。提供形式: 冻干管安全等级: 2模式菌株: no生长条件: 25-28，好氧

海海芽孢杆菌土壤微生物学研究模式菌株: no土壤提供形式: 冻干物安全等级: 1培养基: 444生长条件: 37℃

 -1491℃冰箱冻结；真空冷冻干燥

微小杆菌培养基: 832模式菌株: no土壤提供形式: 冻干物安全等级: 1生长条件: 30℃ 真空冷冻干燥法

假丝酵母属饲料。模式菌株: no复合饲料提供形式: 斜面培养物安全等级: 1培养基: CM0077生长条件: 28-30℃

苏云金芽胞杆菌用于抗虫基因的分离和抗虫相关基础研究。模式菌株: no1-5cm土壤提供形式: 斜面培养物安全等级: 1培养基: 0002生长条件: 30℃

苏云金芽孢杆菌生物杀虫剂模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培养物安全等级: 1培养基: 2生长条件: 30℃

 ATCC39022培养基: 16模式菌株: no种属: Corynebacterium│glutamicum提供形式: 冻干物安全等级: 1生长条件: 30℃ 真空冷冻干燥法

CD34  CD34抗原（表面的唾液粘蛋白）Wnt1  信号通路Wnt1抗体

对香豆CD38(mouse, rat)  CD38多肽（小鼠、大鼠）WNK4  WNK4抗体

延胡索乙素CD38(human)  CD38抗原（人）WNK3 protein  丝氨/苏氨激酶家族成员的基因WNK3抗体

羊藿苷CD36  CD36（多肽）WNK1  赖氨缺陷型蛋白激酶1抗体

柚皮素CD7  CD7抗原WISP39/FKBPL  p21调控蛋白WISP39抗体

原花青素CD40L(CD40 Ligand/TNFSF5/CD154)  CD40L抗原WISP1  Wnt1信号通路蛋白1抗体

标准品CD44  CD44抗原 (多肽抗原)WIPF2  WASP结合蛋白抗体

柚皮苷Argireline peptide   抗皱寡肽-1/六胜肽-3/阿基瑞林/乙酰六胜肽-3WIP1/PPM1D  原癌基因WIP1抗体

岩白菜素GHRP-2 Acetate peptide(Growth hormone-releasing peptides 2)  醋促生长激素释放肽2WIG-1/PAG608 (3E4)  野生型P53诱导基因1单克隆抗体

盐青藤碱GHRP-6 Acetate peptide(Growth hormone-releasing peptides 6)  醋促生长激素释放肽6WIG-1/PAG608  野生型P53诱导基因1抗体
Cry1A（b）基因核酸检测试剂盒Dexamethasone　地塞米松,氟美松（标准品）　质量规格：>97%

DiltiazemHCL　盐地尔硫卓　质量规格：>97%

DiltiazemHCL　盐地尔硫卓(标准品)　质量规格：>97%

Dimesna　地美司钠　质量规格：>97%

Dolasetronmesylate　甲磺多拉司琼　质量规格：>97%

Dolasetronmesylate　甲磺多拉司琼(标准品)　质量规格：>97%

DoxepinHCl　盐多塞平　质量规格：>97%

DoxepinHCl　盐多塞平（标准品）　质量规格：>97%

Duloxetinehcl　盐度洛西汀　质量规格：>97%

Duloxetinehcl　盐度洛西汀(标准品)　质量规格：>97%

Dutasteride　度他雄胺　质量规格：>97%

Dutasteride　度他雄胺(标准品)　质量规格：>97%

Edaravone　依达拉奉　质量规格：>97%

Edaravone　依达拉奉（标准品）　质量规格：>97%

Hydroquinidine　氢化奎宁定;双氢奎尼丁　质量规格：>97%
PCR的反应条件：
因扩增片段的大小、反应体积、使用扩增仪器的不同而不同。
◇ 循环次数
根据模板DNA的量以及扩增片段的大小，设定25～30个循环。
如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，则会出现Smear。
◇ Anneal以及Extension
合适的Anneal温度通常在45～68℃之间 (预备实验可2℃间隔进行)。另外，由于在60～68℃间，也有很高的活性, 因此可在此温度范围内设定Anneal-Extension温度, 进行2 Step PCR。Anneal-Extension温度为68℃ 时，每kbp大体可设定30秒～1分钟；当温度设定在68℃以下时, 时间设定可稍长一些。通常，Anneal温度太高，有时会得不到扩增产物；Anneal温度太低时，容易发生非特异性反应。另外，Extension时间太短时，会得不到扩增产物或者会有一些短的非特异性产物优成；而Extension时间太长时，会出现Smear。