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本公司提供的都是活性的新鲜细胞,具体详情可,来电可享受*!
细胞名称 Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256*
形态特性 实体瘤
生长特性 体内生长
特征特性 常用的大鼠来源瘤株,用于建立大鼠肿瘤移植模型。
培养条件 -
传代方法 制备成细胞悬液接种至Wistar大鼠。
传代情况 不详
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR -
同工酶
染色体 -
使用权限 A类
Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256*操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256*注意事项:
1. 接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256*美国菌种保藏中心, 又称美国模式菌种收集中心(ATCC),是位于马里兰洲洛克菲勒的一家私营的,非赢利性组织。目前它可以提供各种动植物细胞、标准品、菌株达两万多种。ATCC成立于1925年,是世界上大的生物资源中心,由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理,是一家性、非盈利生物标准品资源中心。ATCC向发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品,推动科学研究的验证、应用及进步 ATCC可以提供以下类别生物标准品:细胞株(3000多种);菌株(15000多种);动植物病毒株(2500多种)以及重组物质等。
PeptoneBacteriological
嗜冷菌计数琼脂 Psychrophilic bacteria count agar 用于奶制品中嗜冷微生物的菌落总数测定
葡萄糖蛋白胨培养基 Dextrose Peptone Medium 250 用于生物制品无菌试验
葡萄糖肉汤250g/瓶用于粪链球菌增菌incubationmedia葡萄糖肉汤250g/瓶用于粪链球菌增菌
李氏菌增菌肉汤(LB2) 9ml*20支/包 用于李氏菌二步增菌
七叶苷 20支
5%乳糖发酵管 20支
ONPG 20支
V-P半固体琼脂 20支
LittmanAgar
Wilkns-Chalgren琼脂 250(g) incubation media Wilkns-Chalgren琼脂 250(g)
Fraser添加剂 Fraser Supplement 10毫升 添加到HB4193中,用于李氏菌的选择性增菌培养
CHO培养基基础250用于厌氧菌的糖生化反应(Acumedia方法)incubationmediaCHO培养基基础250用于厌氧菌的糖生化反应(Acumedia方法)
3%氯三糖铁(TSI)琼脂 250g 用于副溶血性弧菌的三糖生化试验
MGC80-3(MGC-803)人胃癌细胞
GDNF Others Human 人 GDNF 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠神经胶质细胞*培养基 100mL
MKN-45人胃癌细胞 Human gasic cancer cells MKN-45 1640+10% FBS
IFNG Protein Mouse 重组小鼠 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白 (His 标签)
NCI-H157(人非小细胞肺腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 SRSV/3T3(SRSV转化的3T3细胞)
MGC80-3(MGC-803)人胃癌细胞
GDNF Others Human 人 GDNF 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠神经胶质细胞*培养基 100mL
MKN-45人胃癌细胞 Human gasic cancer cells MKN-45 1640+10% FBS
IFNG Protein Mouse 重组小鼠 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白 (His 标签)
NCI-H157(人非小细胞肺腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 SRSV/3T3(SRSV转化的3T3细胞)
Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256*LILRA3 Others Human 人 ILT6 / LILRA3 人细胞裂解液 (阳性对照)
人结直肠腺癌细胞;SW620 [SW 620;SW-620]
人肝内胆管上皮细胞*培养基 100mL
P388D1细胞,小鼠淋巴样瘤细胞 艰难梭菌Closidium difficile 非洲绿猴肾细胞;BS-C-1
CXCL16 Protein Rat 重组大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 标签)
PC-3(人前列腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 FGFR3 人细胞裂解液 (阳性对照)