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细胞名称 人肝癌细胞;Huh-7*
形态特性 上皮样细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 此细胞产甲胎蛋白,胰酶α抗体,血浆铜蓝蛋白,纤维蛋白原,纤维粘连蛋白等。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:3传代;3-4天一次
传代情况 PN3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11;D13S317:10;D16S539:10;D18S51:15;D19S433:13,14;D21S11:30;D2S1338:19;D3S1358:15;D5S818:12;D7S820:11;D8S1179:14,15;FGA:22,23;TH01:7;THOX:8,11;vWA:16,18;
同工酶 无
染色体 52-68
使用权限 A类
人肝癌细胞;Huh-7*操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
人肝癌细胞;Huh-7*注意事项:
1. 接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
人肝癌细胞;Huh-7*美国菌种保藏中心, 又称美国模式菌种收集中心(ATCC),是位于马里兰洲洛克菲勒的一家私营的,非赢利性组织。目前它可以提供各种动植物细胞、标准品、菌株达两万多种。ATCC成立于1925年,是世界上大的生物资源中心,由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理,是一家性、非盈利生物标准品资源中心。ATCC向发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品,推动科学研究的验证、应用及进步 ATCC可以提供以下类别生物标准品:细胞株(3000多种);菌株(15000多种);动植物病毒株(2500多种)以及重组物质等。
小鼠细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human phospho protein kinase C (P-PKC) ELISA Kit 人磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA试剂盒
HumanLipoxinA4,LXA4ELISAKit 人脂氧素A4(LXA4)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
ChickenInsulin-likegrowthfactors1,IGF-1ELISA试剂盒鸡胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
载玻片细胞DAPKINASE蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次
MousegranzymesA,Gzms-AELISAKit小鼠颗粒酶A(Gzms-A)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠横纹肌辅肌动蛋白α (sm Actinin-α)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat thioredoxin (x) ELISA Kit 大鼠硫氧化还原蛋白(x)ELISA试剂盒
humanUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit 人高敏甲状腺素(u-T4)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
humanai-neuophilcytoplasmicaibody,cANCAELISA试剂盒人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
植物染色质免疫沉淀分析(CHIP)*试剂盒(包括抗体)10次
humanulasensitivethyroid-stimulatinghormone,U-TSHELISAKit人高灵敏度促甲状腺激素(U-TSH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人未磷酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
猪多巴胺(DA)免疫试剂盒 Pig dopamine,DA ELISA Kit
HumanIerleukin1α,IL-1αELISAKit 人白介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanneuophilgelatinase-associatedlipocalin,NGALELISA试剂盒人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒规格:96T/48T
ELISAKitMHCⅡ/SLAⅡ猪主要组织相容性复合体Ⅱ类规格:48T/96T
HumanFibrinELISAKit人纤维蛋白(Fibrin)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人癌细胞;MDA-MB-157
TYRP1 Others Human 人 P1 / TYRP1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
CM-H134人角膜内皮细胞*培养基100mL
CNE1, 人鼻咽癌细胞系 草鱼吻端细胞,ZC-7901细胞 SW480 [SW-480](人结肠癌细胞)
小鼠淋巴瘤细胞;P388D1(IL-1)
EFNA1 Others Human 人 EFNA1 / Ephrin-A1 人细胞裂解液 (阳性对照)
人癌细胞;MDA-MB-157
TYRP1 Others Human 人 P1 / TYRP1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
CM-H134人角膜内皮细胞*培养基100mL
CNE1, 人鼻咽癌细胞系 草鱼吻端细胞,ZC-7901细胞 SW480 [SW-480](人结肠癌细胞)
小鼠淋巴瘤细胞;P388D1(IL-1)
EFNA1 Others Human 人 EFNA1 / Ephrin-A1 人细胞裂解液 (阳性对照)
人肝癌细胞;Huh-7*CCDC134 Others Human 人 CCDC134 人细胞裂解液 (阳性对照)
猪静脉血管内皮细胞;ZYM-SVEC01
透明质酸酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL
BGC-823人胃腺癌细胞(低分化) BGC-823 human gasic cancer cells (poorly differeiated) 1640+10% FBS
IL4 Protein Human 重组人 IL4 / Ierleukin-4 蛋白
人肠平滑肌细胞(HISMC)( 5×105 ) RA, 大鼠星形胶质细胞 Rattus
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