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特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
登革病毒通用PCR荧光定量检测试剂盒 | Dengue Virus(DENV)RTPCR | 多种规格 | BJ-P6649 |
特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
储存条件:-20℃以下,有效期12个月。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤 1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。 3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。 | 三、注意事项 1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。设立一个专用的PCR实验室。 2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。 3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。 4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。 5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。 6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。 7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
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操作流程
1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器 、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 所有试剂在使用应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用应全部转移至标本准备区,并单独存放。
6. 为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
50g 1,3-二[三(羟甲基)甲氨基]丙烷 Bis-Tris Propane 室温保存 0.156-10 ng/mL 人补体1q(C1q)ELISA试剂盒
250mL Denaturing Lysis Buffer Denaturing Lysis Buffer 常温保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Cystatin-9
2 ug pSPL3 pSPL3 低温运输,-20℃保存
1个 0.5mLDNA超滤离心管(30-50KD) 0.78-50 ng/mL 人葡萄膜自身抗原(UACA)ELISA试剂盒
100g 预混型丙烯酰胺-甲叉双丙烯干粉(19:1) Premixed Acr-Bis Powder 避光干燥保存 0.312-20 ng/mL 人血小板激活因子乙酰水解2(PAFAH2)ELISA试剂盒
50次 分枝杆菌DNAout Myco DNAOUT 常温 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Melanoma antigen preferentially expressed in tumors
100mg D- 果糖 -1,6- 二钠盐 D-Fructose-1,6-diphosphate -20℃保存
0.85%无菌生理盐水(9ml/支) 0.85% Sterile Saline 9ml*20支/包 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Procollagen C-endopeptidase enhancer 1
1 管 BL21 SI大肠杆菌 BL21 SI E.coli Strain -80℃保存 62.5-4000 pg/mL 人α2-纤溶抑制因子ELISA试剂盒
500mL MOPS-EDTA-Sodium Acetate Buffer (MESA),10X MOPS-EDTA-Sodium Acetate Buffer (MESA),10X 常温保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Serine/threonine-protein kinase pim-3
2 ug pHis2 pHis2 低温运输,-20℃保存 0.312-20 ng/mL 人帕金协同调节基因蛋白ELISA试剂盒
登革病毒通用PCR荧光定量检测试剂盒葡萄糖发酵管 英文名称: 产品规格:20支
小鼠性激素结合球蛋白(SHBG)免疫试剂盒进口、分装
小鼠胱天蛋白10(P-10)免疫试剂盒*直销
豚鼠α干扰素(IFN-α)免疫试剂盒进口、组装
人组蛋白H2b(histon-H2b)免疫试剂盒*直销
人原A(PG-A)免疫试剂盒*直销
白j链(Ig-j)免疫试剂盒*直销
人聚集蛋白(Agrin)免疫试剂盒进口、分装
人登革热抗体IgM(DF-Ab IgM)免疫试剂盒进口、分装
人N端中段骨钙素(N-MID-OT)免疫试剂盒进口、分装