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上海市所在地
特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
参数规格:
产品名称:变形杆菌核酸检测试剂盒(荧光PCR 法)
产品规格:50T
产品货号:BJP63509
产品运输:低温运输
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
产品特点:
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。
需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
定量PCR方法:
a、竞争法
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中,待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增(其中一个引物为荧光标记)。扩增后用内切酶消化PCR产物,竞争性模板的产物被酶解为两个片段,而待测模板不被酶切,可通过电泳或高效液相将两种产物分开,分别测定荧光强度,根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
b、内参照法
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物,内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记,下游引物不标记。在模板扩增的同时,内标也被扩增。在PCR产物中,由于内标与靶模板的长度不同,二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来,分别测定其荧光强度,以内标为对照定量待检测模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等标记引物,扩增产物被固相板上特异的探针所结合,再加入抗di高辛或生物素酶标抗体-辣根过氧化物酶结合物,最终酶使底物显色。常规的PCR-ELISA法只是定性实验,若加入内标,作出标准曲线,也可实现定量检测目的。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
鼠B淋巴瘤系拉丁属名: Micrococcus luteus4-羟基吲哚Human RBM26 ELISA
杂交瘤规格: 冰袋泡沫盒快递Bradykinin Fragment 1-7Human ABCB5(ATP-binding cassette sub-family B member 5) ELISA
抗鼠CD4单克隆注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用Bradykinin Fragment 1-5Human RBP2 ELISA
杂交瘤CD25拉丁属名: Bacillus nealsonii氯化耐尔蓝Human RBM28 ELISA
人间质-永生化拉丁属名: Debaryomyces hansenii var. fabryi盐酸氨溴索Human RBM39 ELISA
人内膜癌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用盐酸氨溴索Human RBM4 ELISA
人卵巢癌用途: 害虫生物防治2-巯基苯并恶唑Human RBM19 ELISA
6T-CEM(人T白血病)用途: 研究2-巯基苯并恶唑Human RBMS1 ELISA
人肝癌(高转)-荧光素梅标记拉丁属名: Polaromonas vacuolata2-巯基苯并恶唑Human RBM24(RNA Binding Motif Protein 24) ELISA
人原髓白血病-荧光素梅标记拉丁属名: Enterobacter aerogenes Hormaeche and Edwards磺酸银Human RBMS2 ELISA
人前列腺癌-荧光素梅标记拉丁属名: Brucella sp.磺酸银Human RBM25 ELISA
小鼠肺上皮-荧光素梅标记拉丁属名: Halopelagius inordinatus乙基氯化镁Human RBM26 ELISA
变形杆菌核酸检测试剂盒(荧光PCR 法)L-异亮氨酸/L-异白氨酸/ L-异闪白氨基酸/L-α-氨基-β-甲基戊酸/L-IsoleucineFAM92A1 FAM92A1蛋白抗体100 ul
DL-异亮氨酸/DL-异白氨酸/ DL-2-氨基-3-甲基戊酸/DL-α-氨基-β-甲基戊酸/DL-异闪白氨基酸/DL-IsoleucineFAM98A FAM98A蛋白抗体100 ul
L-亮氨酸/L-白氨酸/L-闪白氨基酸/氨基异己酸/α-氨基-γ-甲基戊酸/α-氨基异己酸/L-2-氨基-4-甲基戊酸/L-α-氨基异丁基醋酸/L-LeucineILDR1 免疫球蛋白样结构域受体1抗体100 ul
D-亮氨酸/D-白氨酸/D-2-氨基-4-甲基戊酸/(R)-2-氨基-4-甲基戊酸/D-LeucineILVBL 乙酰乳酸合成酶蛋白抗体100 ul
DL-亮氨酸/DL-白氨酸/DL-2-氨基-4-甲基戊酸/DL-LeucineBFSP2/Phakinin 晶状体蛋白2抗体100 ul
BOC-L-亮氨酸/BOC-L-白氨酸/N-叔丁氧基羰基-L-亮氨酸/BOC-L-LeucineGFAP delta 胶质纤维酸性蛋白GFAPδ抗体100 ul
N-乙酰-DL-亮氨酸/N-乙酰-DL-白氨酸/α-乙酰氨基异己酸/α-乙酰基异己酸/N-乙酰基-DL-亮氨酸/N-Acetyl-DL-LeucineNPTX2 神经穿透素2抗体100 ul