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在毒理学中吸入染毒技术上,有两个主要方面的重要性日益突出:体外细胞气液界面暴露技术正在消减或取代动物体内暴露的重要性,以及更多的需要根据实际的暴露环境来分析各种暴露因子。这就需要特殊的暴露技术,培养细胞暴露染毒就是迎合了这种要求而诞生的技术。特别是,如今的重点越来越侧重于对吸入气体化合物及各种复杂的混合物,例如香烟烟雾、柴油废气、环境气体对人体健康的影响的研究。在对这些物质进行遗传毒性评价时,通常是基于模型物质的混合物和冷凝物的实验分析。但,在对细胞或细菌进行自然状态下空气污染物或气溶胶状态下的空气污染物暴露实验时,则比较困难,更没有*的技术。 德国Cultex公司研发人员首先提出了气液界面暴露染毒的概念,并成功的研发了Cultex细胞体外暴露染毒系统 In vitro exposure 系统,作为这一技术的*及*,目前为*大部分细胞染毒实验室提供各种类型设备。
Cultex细胞体外暴露染毒技术,其靶向明确、实验周期短、快速高效等特点,不仅可为传统的动物暴露染毒实验提供非常重要的参考价值,同时也能够实现动物实验所无法解决的问题,甚至在一定领域取代有取代动物体暴露染毒实验的趋势,在药理、独立、医学、生命科学领域有都着重要的应用。
气液界面暴露技术结构原理:
传统细胞体外暴露方法是需要暴露的气溶胶物质溶于培养液,然后到达细胞表面,通过细胞与培养液相互作用的方式进行进行染毒实验。对于肺内上皮细胞,这种方式有别于真实的气液界面暴露环境,且暴露效率较低。特别是对于含颗粒物的气体来说,无法通过这种方式进行体外暴露。
A、细胞上面的培养液;
B、微孔膜中培养的细胞;
C、细胞下面的培养液。
特点:低灵敏度;暴露物质与培养液相互作用
CULTEX®体外暴露模块是一种以Transwell膜技术为技术为基础,实现在体外环境下,气溶胶/颗粒物等物质对体外培养的细胞,进行气-液界(真实模拟体内暴露环境)暴露的细胞染毒设备。细胞种在Transwell膜上,膜下方是细胞生长必须的培养基,膜上方,细胞在气-液界面与恒流的气体或颗粒物进行接触。
A、细胞上面的实验气体或气溶胶;
B、微孔膜中培养的细胞;
C、细胞下面的培养液。
主要特点:
1、 耐高温高压材料制造,便于清洗或灭菌,无实验物质残留致使交叉污染;
2、 在气液界面直接暴露,暴露气体无需透过培养基;
3、 模拟真实环境;
4、 暴露期间*保持细胞活力;
5、 底部培养基避免细胞脱水;
6、 可循环提供各种培养液;
7、 避免细胞毒素化合物聚集;
8、 可对细胞进行形态,生化组成及遗传学终点等方面进行评价分析。
系统结构:
Figure : Schematic assembly of the experimental setup for the exposure at the air-liquid interface.
注:此图是统全结构结构模式图。其中,模块类型,气溶胶发生器类型,过滤器类型等根据实验需求,请咨询专业工程师。