技术原理
MO 系列仪器采用微量热泳动(MicroScale Thermophoresis, MST)技术定量分析分子间相互作用。通常对互作分子中的
一个分子进行荧光标记,使之成为非常灵敏的标签分子;与另一个分子结合形成复合物,较之标签分子,复合物分子的热泳动
特性有所改变,因此很容易探测到由结合引起的MST 信号变化。实验结果通过软件自动分析,从而地计算Kd值。
MO 系列仪器测量每一个Kd 值仅需10 分钟,而无需额外冗长的数据分析。通过检测与配体结合后,荧光标记的蛋白或
者具有自发荧光的样品的荧光强度在温度梯度中随时间而变化( 左图中灰色部分 ),然后将标准化的荧光强度对应配体浓
度进行拟合作图,软件自动计算得到该结合的亲和常数 Kd 值 ( 右图 )。
仅需微量样品,在溶液中检测,接近天然环境,无需固定样品,甚至无需进行蛋白纯化。
技术优势
√ 可检测难以检测的样品
包括小分子,G蛋白偶联受体(GPCR)
√ 消耗少量样品
只需要微量样品即可得到Kd值,实验中无需过多消耗您宝贵的样品
√ 快速得到实验结果
几分钟内出结果,助您快速为下一步的实验安排做出决定
√ 适用于各种样品类型
无论细胞培养物、真菌、植物的提取物或生物溶液,甚至是完整的病毒
颗粒和细胞均适合
√ 节省您实验开发的时间
可使用任何的缓冲液,即使需要加入70% DMSO也可检测检测
√ 找出结合更强的配体分子
强亲和力的结合时,灵敏度可以达到皮摩尔(pM)级别
√ 自然状态下进行检测
无需固定样品
√ 可检测微弱的相互作用
可以检测弱亲和力的结合,如毫摩尔(mM)级别的结合化合物片段
仪器型号参数
应用范围
微量热泳动技术可以检测任何生物分子、化合物、纳米材料等分子间于蛋白之间的相互作用,应用范围非常广泛,从离子、小分子、
蛋白、抗体、核酸、病毒、糖类、脂类到高分子量的蛋白复合体。
√ 免纯化直接测定相互作用
√ 模拟体内环境 √ 神经退行性疾病研究 √ 纳米颗粒 √ 基于片段的药物筛选 | √ 基于靶标的药物筛选 √ 测试不受缓冲液类型限制 √ 封闭毛细管进行厌氧实验 √ 竞争性实验 √ 蛋白寡聚化研究
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