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凯杰试剂盒 DNeasy Blood Tissu
从动物血液和组织、细胞、酵母、细菌或者病毒中纯化总DNA
DNeasy Blood & Tissue Kit采用基于硅胶膜技术的离心柱或96孔板方式快速方便的纯化DNA。大多数样本可直接用蛋白酶K消化处理,无需机械破碎,减少了手动操作时间。为特殊样本提供优化的纯化方法,获得高重复性、高纯度的DNA,用于生物研究、基因型分析和兽医病理研究。DNA纯化流程可以使用DNeasy Blood & Tissue Kit,在QIAcube*上自动化进行。
货号/ ID:69504 DNeasy血液和组织试剂盒(50) 50个DNeasy微型旋转柱,蛋白酶K,缓冲液,收集管(2 ml) |
货号/ ID:69506 DNeasy血液和组织试剂盒(250) 250 DNeasy微型旋转柱,蛋白酶K,缓冲液,收集管(2 ml) |
货号/ ID:69581 DNeasy 96血液和组织试剂盒(4) 对于4 x 96 DNA微量制备:4个DNeasy 96板,蛋白酶K,缓冲液,S块,AirPore胶带纸,收集微管(1.2 ml),洗脱微管RS,瓶盖,96孔板寄存器 |
货号/ ID:69582 DNeasy 96血液和组织试剂盒(12) 对于12 x 96 DNA微量制备:12个DNeasy 96孔板,蛋白酶K,缓冲液,S块,AirPore胶带纸,收集微管(1.2 ml),洗脱微管RS,瓶盖,96孔板寄存器 |
DNeasy Blood & Tissue Kit适用于分子生物学应用。该产品不适用于疾病的诊断、预防或治疗。
16plex高效PCR。
使用DNeasy血液和组织试剂盒从人K562细胞中纯化基因组DNA。使用QIAGEN多重PCR试剂盒一式两份,以量的DNA和16对引物进行多重PCR。M:100bp的阶梯。
性能
高效的DNeasy Blood & Tissue操作流程能够从动物血液和组织样本中纯化大量的总DNA(参见下表和"DNA yields")。优化的实验方案可确保非标准样本的高产量,如动物毛发(参见"Genotyping of horses")和培养细胞、固定的组织,或者革兰氏阳性和阴性细菌。*的在线实验方案参考文库,可从酵母、昆虫、毛发和其他类型样本中纯化DNA。
样本来源 | 样本量 | DNA(微克) |
---|---|---|
哺乳动物血液 | 100微升 | 3–6 |
鸟类血液 | 5微升 | 9–40 |
HeLa细胞 | 2 x 10 6 | 15–25 |
肝脏 | 25毫克 | 10–30 |
脑 | 25毫克 | 15–30 |
肾脏 | 25毫克 | 15–30 |
脾脏 | 10毫克 | 5–30 |
小鼠尾 | 1.2 cm(尾部) | 10–25 |
大鼠尾 | 0.6 cm(尾部) | 20–40 |
猪耳 | 25毫克 | 10–30 |
马毛 | 10根毛发 | 2–4 |
鱼鳍 | 20毫克 | 10–20 |
鱼卵(鲭鱼) | 10毫克 | 5–10 |
DNeasy Blood & Tissue Kits简化了从多种样本类型中纯化DNA的流程,包括在生命科学、兽医学和基因分型研究应用中常见的动物种类(参见"High-quality DNA")。纯化得到的DNA不含PCR抑制剂,能在标准多重(参见"Efficient 16plex PCR")real-time PCR(参见"Real-time PCR")中进行灵敏的检测。DNeasy Blood & Tissue Kits确保了可靠的实验结果,从转基因小鼠的实验室分析(参见"High-throughput purification")到家畜的育种项目(参见"Genotyping of pigs")和种系基因分型研究。可以用DNeasy 96 Blood & Tissue Kit方便地扩大常规的检测应用的规模。
原理
DNeasy Blood & Tissue Kit适用于从不同的样本中,包括新鲜或冷冻的动物组织和细胞、血液或者细菌,快速纯化总DNA(如,基因组、线粒体和病原体等)。
DNeasy膜整合了硅胶膜的结合特性,经简单显微离心技术或者QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System处理即可。在高浓度离液盐的环境中,DNA吸附在DNeasy膜上,可以除去溶液中水合分子的水分。DNeasy Blood & Tissue操作流程中设计的缓冲液条件,旨在使DNA特异性吸附到硅胶膜上,并且优化去除污染物和酶抑制剂。
纯化过程不需要*或LF抽提或乙醇沉淀,仅涉及少量手工步骤。这使得DNeasy Blood & Tissue Kits非常适合同时处理多个样本。对于高通量的应用,DNeasy 96 Blood & Tissue Kit能够同时处理96或192个样本。
程序
可靠的硅胶膜技术,利用便捷的离心柱或96孔板形式,确保了快速可重复的DNA纯化,不再需要有机抽提和乙醇沉淀(参见"DNeasy Mini and 96 procedures")。样本首先用蛋白酶K裂解。调整缓冲条件,以提供良好的DNA结合条件并将裂解物上样到DNeasy Mini离心柱或DNeasy 96孔板上。在离心过程中,DNA选择性地结合到DNeasy膜上,污染物通过。余下的污染物和酶抑制剂将在两个高效的洗涤步骤中被去除。然后,用水或缓冲液将DNA洗脱,待用。
DNeasy Mini离心柱预装在收集管中,并且单独封存,确保方便和安全。使用DNeasy Mini离心柱的纯化过程可在QIAcube*上自动进行。DNeasy 96 Blood & Tissue Kit可使用QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System以96孔板形式进行高通量处理。
应用领域
DNeasy Blood & Tissue Kits提供高品质DNA,可直接用于多种下游分析,包括:
特征 | 技术指标 |
应用 | PCR,实时PCR,基因分型 |
洗脱体积 | 100–200微升 |
规格 | 96孔板,旋转柱 |
主要样本类型 | 血液,组织 |
处理 | 手册 |
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 | 痛风 |
样本量 | 100微升/ 25毫克 |
技术 | 二氧化硅技术 |
每次运行或制备时间 | 20分钟– 1小时 |
产量 | 6微克/ 30微克 |