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美国杰出BTX是专业的细胞融合、电穿孔仪的生产厂家。BTX细胞融合仪ECM2001
自从1983年起,苛求的科研工作者就已经把BTX产品作为电融合、转基因等应用领域的优选仪器。除了占世界的电融合、转基因系统外,BTX的产品还包括多达25种相关的配件,其中有多种专业的电极,给用户更多的选择。BTX细胞融合仪ECM2001
BTX还在建立了技术数据库,提供超过5000份的参考目录和600多份的protocols供科研工作者免费查阅。
ECM系列产品在转基因的应用领域中得以广泛的应用,其无以伦比的高性能得到了*同行的厚爱。BTX的系列产品适用于动植物、**、酵母、哺乳动物、人类细胞(包括活体细胞)的转基因等操作,操作方法可参照相关文献,及向厂商索要。
ECM2001是一台*的细胞操作仪器,它综合了电穿孔仪和电融合仪的特点,
ECM2001在细胞融合时,分三个阶段,预融合、融合、后融合阶段
ECM2001在预融合时可产生一种*的高频交流波,交流波将细胞排列成双体或株琏,以便融合的进行,提高了融合的效率。
融合阶段:交流波和直流波的转换之间设有微秒开关,能在极短时间内从交流电转成直流电。在方波长电波的作用下,使细胞高效融合,
融合完成后,ECM2001立即产生了低电压的交流波可使已初步融合的细胞更上乘的聚集在一起,完成细胞圆体程序。
当转基因向导流需要较高的电压和较长的脉冲时,直流方波长脉冲可单独使用,完成转基因。
应用举例
•胚胎操作/核移植/动物克隆 (系统:ECM2001/830)
核移植是将细胞核从供体转入受体的过程。细胞核指导胚胎的发育,导致新生体安全出生。在这个过程中,电融合用于将供体细胞与受体卵细胞融合,并进一步激活细胞分裂,形成胚胎。Meng等人(1997)将核移植技术扩展至灵长类动物模型,克隆出恒河猴。技术的进步使研究人员能够从分裂球进展至更高分化的胚胎细胞以及静止的胚儿细胞,作为核的供应来源。胚胎产生的细胞在体外培养6-13代,然后在转入前使用血清饥饿的方法使细胞静止。如前文所述,Roble、 Cibelli以及Stice是**次在1998年报告使用非老化胚成纤维细胞作为核的供体进行核移植而产生绵羊克隆转基因牛的人。Ian Wilmut在1996年震惊了整个世界,他从成年的细胞产生出**个动物克隆——多利。使用分化的成年细胞进行克隆的能力打开了核移植广泛运用的大门即基因**的令人激动的模式。*近的成功事例PPL Therapeutics公司从成年体细胞克隆出猪。对于这些用途可以使用多种细胞融合样品池及微型载玻片。
•动物细胞融合 (系统:ECM2001)
肿瘤及树突的电融合目前在过继性**疗法中进行使用。肿瘤细胞本身不能作为良好的抗原提成细胞,因此不会刺激T细胞生长。树突细胞是已经发现的*好的抗原提呈细胞,在融合后可以将肿瘤细胞转变成抗原提呈细胞。刺激后比未融合肿瘤细胞至少增加100倍。对于这些用途可以使用多种细胞融合附件及微型载玻片。
•杂交瘤/细胞杂交瘤技术 (系统:ECM2001)
在过去十年中,使用电融合技术进行杂交瘤的产生及抗体大大增加。电融合的过程可以通过显微镜进行观察,与PEG相比需要的细胞数量较少。使用电融合用于这种用途还有无毒性及高效性的优点。
Panova等人(1995)通过把人类B细胞与Heteromyeloma、Spam-8细胞进行电融合增强了人类杂交瘤的生成。Kreutz等人(1998)引入了一种使用电融合及FACS分选的新方法产生细胞杂交瘤。Cao等人(1995)建立了另一种快速非选择性方法通过电融合产生人类细胞杂交瘤。数据明确支持电融合用于这种重要目的的有效性。对于这些用途可以使用多种细胞融合附件及微型载玻片。
植物原生质的融合 (系统:ECM2001)
电融合可被用于融合植物原生质以产生杂交体及创造具有所需特性的作物。Hofmann-Tsay等人(1994)试验了可以的融合促进物质,发现一些多聚物可以便利融合过程而不影响细胞新生。Chen等人(1995)将原生质从2种种属的Porphyria进行融合,成功率高达85%。这些鼓舞人心的数据提示电融合与传统的PEG融合方法相比,可以改善融合效率以及可重复性。对于这些用途可以使用多种细胞融合附件及微型载玻片。