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我司供应的elisa进口试剂盒免费代测,全程ELISA试剂盒实验技术指导,免费代做实验,索取产品说明书。
规格:96T/48T
特点:灵敏性高、特异性强、重复性好
用途:科研实验等领域科学研究,不得用于临床诊断
运输:快递(根据客户要求,选择具体的运输方式)
试剂盒种属:羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等
产品名称 | 小鼠泛素蛋白(Ub)elisa进口试剂盒 |
英文名称 | Mouse ubiquitin protein (Ub) ELISA Kit |
货号 | BJ-G9852 |
备试剂与收集血样:
1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。
2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
样本实验前准备:
ELISA进口试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
FAM3D Protein Mouse 重组小鼠 FAM3D / Oit1 蛋白 (Fc 标签)(3R,5S)氟伐他汀钠盐质量规格:美国进口(3S,5R) Fluvastatin Salt
小鼠背部脊髓神经元(MN-dsc)(1×106) DU 145, 人前列腺癌细胞 Human(3R,5S)-氟伐他汀钠盐质量规格:美国进口(3R,5S)-Fluvastatin Salt
中国仓鼠卵巢细胞-二氢叶酸还原酶缺陷型;CHO/dhFr-氟伐他汀质量规格:美国进口Fluvastatin
CHEK1 Others Human 人 CHK1 / CHEK1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 克林沙星盐酸盐质量规格:美国进口Clinafloxacin
CL-0033BGC823(人胃癌细胞)5×106cells/瓶×2外消旋西他列汀质量规格:美国进口rac-Sitagliptin
人膀胱平滑肌细胞裂解物HBdSMCLN-乙酰-5-甲氧基色,英文名或英文缩写:Melatonin,级别:BR,99%,规格:25克
SDF2 Others Mouse 小鼠 SDF2 / SDF-2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 亮酸脱氢酶 Leucine Dehydrogenase (50 units/mg) 9082-71-7 1KU 通用试剂
小鼠骨髓瘤细胞;Fox-NY酰安;安基全 ForMcMidq;ForMic ccid cMidq;ForMylcMidq;cMidq C1 1972-1-7
SK-OV-3细胞,卵巢癌细胞 人胃癌细胞系,HS-746T细胞 豹猫肌肉成纤维样细胞;LCM41,5-disulfonicacid阿姆斯特朗酸1克高,98%
tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);F9-CAG-tTA-4D6923-32-0DL-胱酸;DL-3,3′-二硫代双(2-基酸); DL-双硫代酸DL-Cystine;
EPHA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphA4 人细胞裂解液 (阳性对照) N-乙酰-L-蛋酸shēng huà shì jì容量:RT,避光25克
人神经细胞HNS-(2-安基)溴化异流脲鎓轻溴醋盐 2-(2-cminoqthyl)isothiourqc dixy7nobromidq 26-10-0
HL-60/Ad细胞,人白血病阿霉素耐药株 小鼠单核巨噬细胞,J774A.1细胞 尿道上皮细胞培养基UCM蓝色葡聚糖2000shēng huà shì jì容量:保存:-20℃1克
MDA-MB-468-06(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2Hugh-Leifson培养基shēng huà shì jì容量:25毫升
AtT-20(小鼠垂体瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R099大鼠表皮色素细胞*培养基100mL EB病毒转化的人B细胞;KMY0904701-97-33-环己基Cyclohexanepropionic acid
小鼠泛素蛋白(Ub)elisa进口试剂盒RKO(人结肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2雷公藤甲素(标准品)Triptolide质量规格:HPLC≥98%,标准品
Gibco 17005042 Keratinocyte-SFM (1X), Liquid(10724-011和37000015) 500ml雷公藤内酯酮(标准品)Triptonide质量规格:HPLC≥98%,标准品
人肾系膜细胞cDNAHRMC cDNA类叶升麻苷,毛蕊花糖苷(标准品)Acteoside质量规格:HPLC≥98%,标准品
CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 人细胞裂解液 (阳性对照) 利卡灵-B(标准品)(-)-Licarin B质量规格:HPLC≥98%,标准品
人软骨细胞*培养基 100mL利血平(标准品)Reserpine质量规格:HPLC≥98%,标准品
实验步骤:
石蜡包埋组织切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 将待做切片置于切片架上,于 60℃恒温烤箱中至少烤 1 hr;
2.脱蜡: 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片经下行酒精水化,无水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自来水冲洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修复: 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复,常采用高压、微波(温度达到 98~100℃)或酶消化修复法,室温自然冷却,自来水冲洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗涤(2×2min)(具体修复方法见附 1)* 注:有些抗原勿需修复,直接进入第 5 步封闭。
5.封闭: 滴加试剂 B,37℃湿盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用试剂 C(即用型一抗),37℃湿盒孵育 2 hr 或 4℃过夜;
7.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);
8.封闭: 滴加试剂 B,37℃湿盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗(试剂 D),37℃湿盒中孵育30 min;
10.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);
11.封闭: 滴加试剂 Tween 20,37℃湿盒孵育封闭 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用试剂 C 稀释的试剂 E(1:50~200,终浓度 5~20 nM),37℃湿盒中孵育 30 min;
13.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min),TBS 洗涤(2×5 min);
14.显色:应用 DAB 溶液(试剂 F)显色;
15.复染:自来水充分冲洗,复染,脱水,透明;
16.封片: 待组织标本干后,用试剂缓冲甘油封固剂封片;
17.观察成像: 显微镜下观察成像。