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DC细胞

具体成交价以合同协议为准

2022-04-18上海市
型号
参数
品牌:其他品牌 适用领域:科研 产地:国产 加工定制:是 货号:FS-01X9876
上海抚生实业有限公司

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产品简介
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详细信息

产品属于:

产品名称:DC细胞    

产品规格:1×106

货号:FS-01X9876

产品类型:原代细胞

单位:T25/瓶

提供细胞鉴定:提供免疫荧光鉴定报告

保存培养温度(℃):37

运输温度(℃):常温

 

   

98.jpg 

细胞培养的优点:

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

注意事项:

1. 接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。

2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。

3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。

6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

兔心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒英文名称:Rabbit cardiac troponin Ⅰ,cTn-ⅠELISA Kit规格:96T/48T

兔核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒 英文名称:Rabbit receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL ELISA Kit 规格:96T/48T

兔乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISA试剂盒 英文名称:Rabbit Lactoferrin,LTF/LF ELISA Kit规格:96T/48T

兔心肌特异性肌钙蛋白T(c)ELISA试剂盒 英文名称:Rabbit cardiac isoform of Tropnin T,c ELISA Kit规格:96T/48T

兔溶菌(LZM)ELISA试剂盒 英文名称:Rabbit Lysozyme,LZM ELISA Kit规格:96T/48T

兔子催乳(PRL)ELISA试剂盒英文名称:Rabbit prolactin,PRL ELISA Kit规格:96T/48T

兔子促黄体(LH)ELISA试剂盒 英文名称:Rabbit luteotropic hormone,LH ELISA Kit规格:96T/48T

兔抗脑组织抗体(ABAb)ELISA试剂盒 英文名称:Rabbit anti-brain tissue antibody,ABAb ELISA Kit 规格:96T/48T

p53(p53)ELISA试剂盒 英文名称:Rabbit p53/tumor protein,p53/TP53 ELISA Kit 规格:96T/48T

Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒 英文名称:Rabbit Bcl-2 Assaciated X protein,BAX ELISA Kit 规格:96T/48T

兔阿霉(ADR)ELISA试剂盒英文名称:Rabbit adramycin,ADR ELISA Kit规格:96T/48T

兔基质金属蛋白2/明胶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA试剂盒英文名称:Rabbit matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA Kit规格:96T/48T

兔抑瘤M(OSM)ELISA试剂盒英文名称:Rabbit Oncostatin-M,OSM ELISA Kit规格:96T/48T

兔血管生成2(ANG-2)ELISA试剂盒英文名称:Rabbit Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit规格:96T/48T

兔血管紧张Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒英文名称:Rabbit angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit规格:96T/48T

兔可溶性凋亡相关因子(sFAS/Apo-1)ELISA试剂盒 英文名称:Rabbit soluble Factor-related Apoptosis,sFAS/Apo-1 ELISA Kit规格:96T/48T

6前列腺F1a(6-keto-PGF1a)ELISA试剂盒英文名称:Rabbit 6-keto-prostaglandin F1a,6-K-PGF1a ELISA Kit规格:96T/48T

兔血栓B2(TXB2)ELISA试剂盒英文名称:Rabbit Thromboxane B2,TX-B2 ELISA Kit规格:96T/48T
DC细胞SHOC2/Sur8  富含亮重复蛋白SHOC2抗体规格: 0.2ml

RAMP/CDT2  维甲调节核基质相关蛋白规格: 0.2ml

MTMR8  肌管相关蛋白8抗体规格: 0.2ml

NIFK  KI67相互作用蛋白抗体规格: 0.2ml

phospho-NIFK/MKI67IP(Thr234)  磷化KI67相互作用蛋白抗体规格: 0.1ml

TACC1  乳腺癌、胃癌抗原GA55抗体规格: 0.2ml

ABCF3  三磷腺结合盒转运蛋白F亚基3抗体规格: 0.2ml

ABHD1  肺α/β水解蛋白1抗体规格: 0.2ml

 


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