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人睫状神经营养因子elisa试剂盒说明书

具体成交价以合同协议为准

2018-02-02上海市
型号
参数
适用领域:科研 产地:国产 加工定制:是
上海研生实业有限公司

初级会员9经销商

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产品简介
人睫状神经营养因子elisa试剂盒说明书提供免费ELISA试剂盒代测,快速检测一周内出结果用于测定血清,血浆及相关液体等样本,效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存,公司全程提供技术指导。
详细信息

公司人睫状神经营养因子elisa试剂盒说明书优点多多,更加方便我们的科研学者进行科学实验,是科研实验伙伴。
(1)、高效、灵敏、特异的抗体;
(2)、稳定的重复性和可靠性;
(3)、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
(4)、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
(5)、节省实验经费。  

                  产品名称

            英文缩写

  规格

人睫状神经营养因子elisa试剂盒说明书

HumanCNTFELISAKit

48T/96T

人睫状神经营养因子elisa试剂盒说明书 英文缩写:HumanCNTFELISAKit  特点:灵敏性高,高效性,吸附均匀,吸附性好,回收利用率高,是一款可以让您放心选购的ELISA试剂盒产品。 常用试剂名称:人睫状神经营养因子(CNTF)elisa检测试剂盒  规格: 48T/96T

人睫状神经营养因子elisa试剂盒说明书 样品收集、处理及保存:
1. 细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
2. 细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104 -106 /ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或 者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
3. 血清:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
4. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上 清。
5. 体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
6. 组织标本:切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000 rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。
7. 样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标 本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37或更高的温度加热解 冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人睫状神经营养因子elisa试剂盒说明书 技术流程:

        双抗体夹心法(检测未知抗原)

        间接法(检测未知抗体)

1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml4 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)
3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml37 孵育0.51小时,洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml37 1030分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml 每孔加0.1ml4过夜。次日洗涤3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,37孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
3
、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml37孵育30-60分钟,洗涤,Z后一遍用DDW洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml37 1030分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

人睫状神经营养因子elisa试剂盒说明书 操作步骤:
1. 取出试剂盒,室温(20-25)放置 30 分钟。
2. 分组:取出 96 孔板,根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准 品组(6 个浓度)、空白孔、待测样品组。 注:为减少实验误差,保证准确性,建议设置复孔。
3. 加样:依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中;空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水;其余微孔中加入 50ul 的待测样本。
4. 加酶标溶液:标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液(空白对照孔除外)。
5. 温育:酶标板用封板纸密封后,放入湿盒内于 37恒温孵育 1 小时。
6. 洗板:用稀释后的洗涤液注满每孔,静置 15-30s,充分清洗酶标板 5 次,用吸水纸*拍干。 7. 显色:各孔加入显色剂 A 50ul 后,再加入显色剂 B 50ul
8. 终止:25-37下避光反应 10-15 分钟,加入 50ul 终止液。
9. 读板:在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。 注:读板时必须拭干板底残留的液体和手指痕迹,读板时间控制在终止反应后的 30 分钟内,以免影响准确性。
数据计算
1. 绘制标准曲线:各标准品 OD 值减去底色即减去空白孔 OD 值,以 6 个标准 品的 OD 值为纵坐标 y,以标准品的浓度为横坐标 x,绘制曲线图,如图示, 并计算出回归方程 y=ax+b
2. 将待测样品的 OD 值代入方程式,计算各组样品浓度,再乘以稀释倍数,即 为样品的实际 ABP 浓度。
3. 敏感度:1.0 pg/ml
人睫状神经营养因子elisa试剂盒说明书售后服务:
1.有质量问题免费包换,合同上注明了的。(质量问题包括运输不当,客户在使用过程中测不出结果,等等!)
2.
全程技术指导。(包括售前的标本收集,使用过程中不明白的地方,实验结束后的数据分析,有任何疑问,我们技术都会即时给你去电)
3.
提供免费代测的服务。(你只需把标本寄过来,我们为你节省时间,帮你出结果,原始数据,分析数据均可提供,一般时间是5天左右)
4.
客户有任何问题,我们都是在一个工作日之内给出解决方案。售后和技术这一块都是竭诚为客户服务。
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适用领域 科研
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