《细胞计数仪校准规范》征求意见
- 2021/11/30 15:47:57 28289
- 来源：仪表网
细胞计数是一项基本的生物测量活动，主要应用临床检验、生物药物开发、细胞治疗、质量检测等生物技术领域中。细胞计数的传统方法是采用血球计数板在显微镜下进行人工计数，该方法易受操作细节和操作者的主观判断影响，而且检测通量小从而导致方法的精确性不高，并且费时费力，不适合于大规模的细胞测量。全自动细胞计数分析仪摆脱了手工计数细胞的繁复，同时结果更加准确客观，操作快速简便，重复性好。近年来随着细胞治疗和生物药物产业的迅速崛起，用于相关细胞产品质量评价分析的细胞计数仪被广泛采用。目前，市面上自动细胞计数仪的品牌繁多，主要的技术原理主要有两种：基于细胞显微图像的和基于库尔特原理的。
随着多数细胞计数仪的广泛应用，其测量结果的标准化已成为关注点。理想情况下，同一样本在不同实验室、不同时间段、使用不同细胞计数仪，同一参数的测定结果应该一致，只可能受生物学变异的影响。但是，面对众多的细胞计数检测硬件平台和试剂体系，目前还没有一个建立完善的计量基标准系统对其量值溯源提供技术保证，从而保证不同体系之间测量的可比性和准确性。
因此，急需制定细胞计数仪的计量校准规范，使得临床和医药行业的细胞测量仪使用标准得以统一，使此类标准器具的校准工作做到更加标准化和系统化。
《细胞计数仪校准规范》依据JJF 1071-2010 《国家计量校准规范编写规则》、JJF 1059.1-2012 《测量不确定度评定与表示》等完成规范的制定。在本规范制定过程中，也参考了现行有效的 ISO/DIS 20391-1:2018Biotechnology - Cell counting - Part 1: General guidance on cell counting methods和JJG 714-2012 《血细胞分析仪检定规程》。
本规范引用了下列文件：JJF 1001-1998 通用计量术语及定义；GZJLYZ00-002 校准操作规范编写规定。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本规范；凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本规范。
根据JJF 1071-2010 《国家计量校准规范编写规则》的要求，本规范架构上包括封面、扉页、目录、引言、范围、引用文件、术语和计量单位、概述、计量特性、校准条件、校准项目和校准方法、校准结果表达、复校时间间隔、附录几个部分。
校准环境条件：
1. 实验室环境应当满足仪器安装的要求，不得存在强烈的机械振动和电磁干扰。2. 环境温度：按照细胞计数仪说明书规定的温度条件进行。3. 相对湿度：按照细胞计数仪说明书规定的湿度条件进行。4. 光照：避免阳光直射。5. 电源电压：AC220 V±22 V，50 Hz/60 Hz 或相应的直流电源。6. 大气压力：76 kPa～106 kPa。
校准项目和校准方法：
外观要求
用目视并配合手动操作进行检查。仪器外表应光滑平整，不应有影响工作性能的机械损伤；显示屏表面应平整洁净无划痕，读数清晰；开关及按键功能良好。仪器应有以下标识：名称、型号、编号、生产厂家、出厂日期。
测试前准备
开启仪器，参照仪器使用说明书，使仪器达到最佳工作条件。根据客户使用要求、被校准仪器的日常工作模式和选取的标准物质类型选取合适的细胞测量模式。
空白值
取空白稀释液、纯水或蒸馏水进行上样计数，测量4次，记录测量值并取其中的最高值作为空白值。
示值误差
仪器的示值误差以细胞浓度(总细胞浓度、活细胞浓度和死细胞浓度)标准物质、细胞活率标准物质、颗粒直径标准物质测量值与标准值的误差表示。根据被校准仪器的日常工作模式选取合适浓度、比例和颗粒直径的标准物质，使用标准物质前上下颠倒30-50次左右从而保证充分混匀(瓶底无沉积物)。用移液器从充分混匀的标准物质样本液体中间层吸取液体进行上样计数，测量5次，记录测量值。
测量重复性
仪器重复性以细胞浓度(总细胞浓度、活细胞浓度和死细胞浓度)标准物质、细胞活率标准物质、颗粒直径标准物质10次测量值的实验标准偏差表示。根据被校准仪器的日常工作模式选取合适浓度、比例和颗粒直径的标准物质，使用标准物质前上下颠倒30-50次左右从而保证充分混匀(瓶底无沉积物)。用移液器从充分混匀的标准物质样本液体中间层吸取液体进行上样计数，测量10次，记录测量值。
校准结果表达：
经校准后的细胞计数仪应填发校准证书，校准证书应符合JJF1071-2010中5.12的要求，参照附录C给出校准项目名称、测量值以及扩展不确定度。
本规范适用于基于显微图象原理、电阻抗原理进行细胞浓度、细胞活率和颗粒直径分析测量的细胞计数仪的校准，其他类型的细胞计数仪可参照本规范进行校准。
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